也有研究显示,IGF-1R及其下游信号传导通路的激活不仅可介导对EGFR信号通路的旁路激活过程,同时在许多肿瘤细胞产生EMT的过程中也起了重要作用。因此,我们推测：EMT可能是通过IGF-1R及其下游PI3K/AKT激活诱导NSCLC细胞对EGFR-TKIs产生获得性耐药。因既往基础研究中仅观察了EGFR野生型的A549细胞对EGFR-TKIs获得性耐药过程中EMT的确认细节改变,对EGFR突变型NSCLC细胞是否如此,以及是否在EGFR野生型细胞中具有普遍性,尚未见报道。且既往研究仅限观察了EGFR-TKIs获得性耐药中IGF-1R蛋白的表达,对其信号转导通路是否异常尚有待探讨。本研究同时选用EGFR突变型和野生型NSCLC细胞,分别用吉非替尼和厄洛替尼将其诱导成EGFR-TKI s获得性耐药细胞,观察NSCLNU7441 价格C细胞在对EGFR-TKI s获得性耐药过程中EMT及IGF-1R、EGFR信号通路相关分子的改变,以期探讨NSLCL对EGFR-TKIs产生获得性耐药的可能机制。 方法 1、选用EGFR突变型和野生型的人NSCLC细胞PC-9和H460,分别用吉非替尼和厄洛替尼将其诱导成耐药的PC-9/ZD和H460/ER细胞。高分辨率溶解曲线分析技术(Q而且uantitative PCR high-resolution melting,qPCR-HRM)检测H460及PC-9细胞EGFR及Kras基因突变；MTT法检测各组细胞的增殖情况,划痕实验及Transwell侵袭实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白质印迹法和RT-PCR法分别检测IGF-1R及EGFR信号通路分子及EMT相关分子的蛋白和mRNA表达。 2、统计方法 采用SPSS13.0软件进统计学分析,结果数据以x±s表示。