结论 DOT1L基因通过MAPK信号通路调控胃癌细胞的增殖。
目的 通过生物信息学预测DOT1L基因在胃癌(gastric cancer,GC)中的增殖信号通路,探讨其对胃癌细胞增殖的可能机制。方法 从TCGA数据库中下载GC基因表达数据及临床数据,用R语言对数据整理后筛选出差异基因(DEGsPX-478临床试验)并进行GO功能注释,应用KEGG和GSEA进行富集分析,预测GC增殖可能的信号通路。采用Western blotting方法检测GC细胞株MGC-803、BGC-823、SGC-7901、MKN-45和AGS中DOT1L的表达。以DOT1L高表达的胃癌细胞株MGC-803、SGC此网站-7901为后续研究对象,实验分为 对照组(NC)、沉默组(shDOT1L)和过表达组(oe-DOT1L)。采用real-time PCR检测shDOT1L组mRNA的沉默效果;通过Western blotting检测shDOT1L组中DOT1L蛋白和MAPK信号通路相关调控蛋白的Selleckchem Z-VAD-FMK表达量;采用细胞集落克隆实验和CCK-8法检测shDOT1L组和oe-DOT1L组细胞增殖能力。结果 与癌旁组织相比,在GC组织中DOT1L表达水平明显升高(P<0.05);运用Kaplan-Meier分析发现GC组织中DOT1L高表达组患者总体生存率(OS)显著降低(P<0.05);富集分析结果显示DOT1L表达升高与MAPK信号通路显著相关(P<0.05)。