优化反应条件确定 最佳抗体包被条件为4℃过夜,最佳封闭液为3%的BSA,最佳封闭条件为37℃封闭2 h,最佳多抗作用条件为37℃反应50 min。在优化后的条件下建立了夹心ELISA方法的标准曲线,对黄曲霉菌检测限可达到0.1μg·mL~(-1),比前期报道的常规容量反应体系灵敏度提高了约10倍。该方法特异性强,与青霉菌、尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、赭曲Cell Cycle抑制剂霉菌均无交叉反应,且检测非产毒黄曲霉菌株信号值较低,接近于阴性值。重复性试验显示,板间变异系数为1.5%—5.8%,板内变异系数为0.4%—3.2%,均小于7%,说明该方法稳定性好。采用该方法对花生、玉米等农产品进行添加回收试验,平均回收率在81.9%—109.0%。【结论】本研究建立的大容量反应体系夹心ELISA方法可快速PFTα鍗婃姂鍒舵祿搴PFTα浠锋牸、高灵敏地检测黄曲霉毒素产毒菌,为从源头上控制黄曲霉毒素污染提供了新的快速、方便的检测技术支撑。
弓形虫病是一类重要的人畜共患寄生虫病,可导致宿主出现神经症状和繁殖障碍等疾病,同时对养殖户和消费者健康造成巨大的威胁。为了掌握河南省鹤壁市肉羊弓形虫病流行情况,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对鹤壁市不同地区33个PD98059化学结构羊场随机采集的728份肉羊血清样品进行了弓形虫抗体检测。结果表明 13个羊场含有弓形虫病阳性羊只,场阳性率39.39%,共83份血清样品检测为阳性,总阳性率11.40%;舍饲羊群弓形虫病阳性率较放牧羊群低,分别为9.88%和15.09%;不同发育阶段羊群弓形虫病阳性率有较大差异,其中以成年母羊偏高,为16.21%,仔(幼)羊群最低,为4.61%。说明鹤壁市肉羊弓形虫病流行情况较为严峻,相关防控措施需要实施。