7细胞中,淫羊藿苷对LPS的细胞毒作用具有保护作用；免疫印迹和共聚焦显微镜分析表明,淫羊藿苷预处理RAW
Microbiology抑制剂 264.7巨噬细胞后,能够减少p65核转位；淫羊藿苷能够激活PI3K/AKT信号通路。 结论：(1)淫羊藿苷具有抑制LPS诱导的小鼠肺组织炎症反应的作用；(2)淫羊藿苷能够抑制LPS诱导的小鼠肺组织炎症因子基因表达；(3)淫羊藿苷能够抑制p65从胞浆进入细胞核；(4)淫羊藿苷能够激活PI3K/AKT信号通路。
目的和意义:随着微波技术的广泛应用和信息时代的到来,人们暴露于微波辐射的机会与日俱增,各种通讯设施和医疗设备的影响尤为突出。微波的生物效应及其机制研究是目前生物电磁学的前沿课题。微波辐射具有明显的中枢神经系统损伤效应,海马是最敏感的靶区,但其致伤机制未明。线粒体结构和功能与能量代谢密切相关,也是微波辐射最早累及的靶点之一,而HIF-1α/ERK信号通路可能在微波辐射致海马神经元线粒体损伤过程中发挥重要作用。因此,研究微波辐射致海马线粒体损伤中HIF-1α/ERK信号通路的改变及意义,将为深入研究微波辐射损伤机制和防治措施提供新靶标和思路,对于平时作业人员的卫生防护和现代高科技战争中作战人员的安全保障具有重要的理论和现实意义。 材料和方法:(1)采用2.5、5和10mW/cm~2的微波辐射192只二级雄性Wistar大鼠,辐射时间为6min/次,5次/w,连续辐射1m。大鼠于辐射后6h、7d、14d、1m、2m和6m,采用Morris水迷宫检测其学习和记忆能力;通过HE、尼氏体染色和电镜观察海马组织结构和线粒体超微结构的变化;采用高效液相色谱法检测海马组织中氨基酸类神经递质含量的变化;采用Real-time PCR检测海马组织中hif-1αmRNA表达;通过Western Blot、免疫组织化学和图像分析等手段检测海马组织中HIF-1α、ERK1/2和p-ERK1/2表达。(2)采用30mW/cm~2微波辐射经NGF诱导的PC12细胞5min,通过电镜、Luminometer、多功能酶标仪、荧光显微镜等技术,观察PC12细胞线粒体结构和功能变化;采用Real-time PCR、Western Blot、免疫细胞化学和图像分析等技术,检测PC12细胞中hif-1αmRNA、HIF-1α、ERK通路分子(ERK1/2、p-ERK1/2、Raf、p-c-Raf和p-MEK1/2)、HIF-1靶基因(VEGF)、能量代谢相关基因(COXⅠ和COXⅣ)的表达变化;通过U0126和HIF-1α高表达质粒的干预等手段,研究微波辐射后ERK通路对HIF-1α的调控作用以及HIF-1α对PC12细胞线粒体功能的影响。
实验结果:(1)大鼠学习记忆能力和氨基酸类神经递质变化:辐射后7d,10mW/cm~2组大鼠平均逃避潜伏期显著长于假辐射组(P<0.05);辐射后1m,各辐射组与假辐射组相比,平均逃避潜伏期均延长(P<0.05或P<0.05或P<0.05);辐射后14d和2m,Asp和Glu含量均降低(P<0.05或P0.05);10μmol/l U0126干预2h后经30mW/cm~2微波辐射1~24h,H组ATP含量抑制率低于N组,ΔΨm于辐射后1h和6h无明显变化(P>0.05),辐射后12h和24h明显升高(P
研究目的:反复短暂的心肌缺血/再灌注可使心肌在随后持续性缺血中得到保护的现象,称为缺血预适应(ischemic PI3K抑制剂 prenconditioning,IP),IP是心肌的一种内源性保护机制。多次短暂的大强度运动诱导心肌相对缺血/再灌注也可对心肌产生IP样的保护作用,称为运动预适应(exercixe
prenconditioning,EP),EP是IP的一种特殊形式。研究表明,IP和EP的保护作用都与诱导内源性保护物质的产生有关。肾上腺髓质素(Adrenomedullin,ADM)是新发现的重要的心脏内源性保护物质,心脏产生这种物质;ADM对心脏的直接保护作用;特异性阻滞剂可阻断ADM的保护作用;外源性给予ADM可产生心脏保护作用;运动可诱导ADM的产生和释放。EP是有效的心脏保护措施,ADM是重要的心脏内源性保护物质,运动可诱导ADM的产生,EP的心脏保护作用是否是通过ADM,其保护作用的机制是什么,长期和短期EP的保护效果及其机制有什么不同,目前国内外还没有报道。因此,本研究在建立短期和长期EP模型的基础上,探讨ADM介导EP心脏保护作用及其机制,为EP心脏保护作用及其机制的研究提供新的理论和实验依据。 研究方法:本研究采用雄性SD大鼠90只,随机分为对照组(C组),异丙肾上腺素组(isoprenaline,ISO组),3天(短期)运动预适应组(3dEP组),3周(长期)运动预适应组(3wEP组),3天运动预适应+异丙肾上腺素组(3dEP+ISO组),3周运动预适应+异丙肾上腺素组(3wEP+ISO组)。3dEP组、3dEP+ISO组和3wEP组、3wEP+ISO组分别进行连续3天和3周的间歇跑台训练建立3天和3周EP动物模型。在最后一次运动结束后30min,3dEP+ISO组和3wEP+ISO组通过腹腔注射大剂量ISO,ISO组同时腹腔注射等量ISO,复制大鼠心肌缺血损伤模型。采用免疫化学发光法检测血清心肌肌钙蛋白I(cardiac BIBR 1532体内 troponin I,cTnI)的含量;用HE染色法观察心肌组织形态结构改变;用苏木素碱性复红苦味酸染色法(haematoxylin basie fuchsin picric,HBFP染色)观察心肌缺血缺氧改变;用透射电镜观察心肌细胞超微结构改变;用酶联免疫法检测血清和心肌ADM的含量;应用原位杂交技术显示心肌细胞ADM mRNA的定位表达;用免疫组织化学法显示心肌、冠状血管ADM的分布与表达;用计算机图像分析技术对心肌细胞的ADM mRNA,心肌组织、冠状血管ADM进行定量分析。 研究结果:(1)ISO组血清cTnI含量明显高于C组(p<0.05);3dEP组和3wEP组血清cTnI含量与C组相比,差异均不具有显著性;3dEP+ISO组血清cTnI含量明显高于C组(p<0.05),但明显低于ISO组(p<0.05);3wEP+ISO组血清cTnI含量与C组相比,差异不具有显著性,但明显低于ISO组(p<0.