此联合应用在体内的效果及其机制正在进一步研究中。 此外,我们还对筛选到的阳性化合物S7及S39做了进一步药效药理的研究。 使用基于Kinase-Glo发光激酶检测法的Aurora B高通量筛选模型检测了阳性化合物对体外Aurora B激酶活性的抑制能力,发现阳性化合物的抑制能力与VX680相当。利用分子对接的方法模拟了阳性化合物与Aurora B的结合作一般用。 进一步验证了化合物在细胞水平上对肿瘤细胞系的生长抑制的IC50值,两个化合物分别对不同组织来源的细胞系包括肝癌、黑色毒瘤、结肠癌、宫颈癌等显示出不同程度的生长抑制；通过对多种细胞株的时间梯度和药物浓度梯度生长曲线进行检测,测定出化合物对细胞生长抑制的的时间曲线；通过克隆形成率实验证明化合物处理的肿瘤细胞单克隆的形成能力大大有下降；通过RNAi的方法发现化合物对内源性Aurora B消减后细胞生长的抑制作用下降。 利用流式细胞仪检测到化合物处理的细胞出现显著的G2/M期阻断和细胞凋亡。通过western blotting, immunofluorescence的方法检测到化合物处理的细胞内源Aurora B(Thr232)及Histone H3(Se购买3-MAr10)的磷酸化水平大幅下降。通过以上方法验证化合物对内源性Aurora B活性的抑制,初步探明了化合物抑制肿瘤细胞增殖的机制。 为验证化合物在体内对肿瘤生长的抑制作用,我们建立并使用了SMMC7721裸鼠移植瘤模型。化合物S39显示了显著的抑瘤效果及较低的毒性。 另外,我们也使用细胞水平上联合用药的筛选模型,初步检测了S7、S39与临床上常用的抗肿瘤药物的联用能力,联合应用的生理现象及机制尚需进一步研究。