5组Smad2、TGF-β1、RORγt、Foxp3 mRNA水平均增高(P
研究背景和目的肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,每年新发现的病人约70万,其中半数发生在我国。发病率高、死亡率高及有效治疗手段的缺乏使深入研究肝癌发病机制、探寻防治新靶点显得极为迫切。绝大多数肝癌病人都有肝纤维化、肝硬化的病史。而肝纤维化是肝脏损伤的一种高度保守的反应,发生在几乎所有与肝细胞死亡相关的疾病中。肝纤维化的病因包括病毒性肝炎、非酒精性脂肪肝、酒精性脂肪肝、胆汁阻塞性疾病和肝脏自身免疫性疾病等。肝纤维化是一个多细胞反应性疾病,其中肝星状细胞发挥最主要的作用,产生约90%的细胞外基质。肝纤维化晚期发展为肝硬化,而肝硬化具有很高的癌变风险,相当一部分最终发展为肝癌。因此,探寻肝纤维化的治疗手段和发现新的干预靶点具有同样重要的临床意义。HLF(Hepatic Leukemia Factor)的发现源于E2A-HLF融合基因的克隆。E2A-HLF是由t(17;19)(q22;p13)易位形成的融合基因(19号染色体短臂13区的E2A基因与17号染色体长臂22区的HLF基因融合),最早发现于儿童前体B细胞急性淋巴细胞白血病(B cell precursor acute lymphoblastic leukemia);当时通过Northern-blot检测发现,HLF的表达仅限于肝细胞和白血病细胞中,因此将其命名为肝细胞白血病因子。后续的研究还发现,HLF属于脯氨酸和酸性氨基酸含量丰富的碱性亮氨酸拉链(proline

and acidic amino acid-rich basic leucine zipper,PAR bZIP)转录因子家族成员；该转录因子家族另外两个成员是白蛋白-D位点结合蛋白(albumin 而且 D-site-binding protein, DBP)和毒性当量因子(thyrotroph

embryonic factor,TEF)。HLF通过形成同型二聚体或与其他PAR bZIP家族成员形成异型二聚体的方式,结合靶基因启动子区特异的DNA序列并激活转录。PAR bZIP转录因子家族与细胞的生物节律密切相关。研究表明,PAR bZIP家族蛋白DBP、TEF和HLF的同时缺失,会导致小鼠寿命缩短,出现心肌肥大、低血压、低醛固酮等症状,并易发生癫痫而死亡。前期研究发现HLF与造血干细胞的分化和功能有关,在造血系统的恶性肿瘤中发挥重要的作用,同时它还参与肝脏的代谢。但HLF在肝纤维化和肝癌中的作用未见报道。因此,本课题将系统研究HLF在肝纤维化和肝癌发生发展中的作用及分子机制,并结合临床资料探讨其作为肝纤维化和肝癌干预靶点及预后标志物的可行性。研究方法：1.鉴定并繁殖HLF组成性转座敲除小鼠,建立CCl4及胆管结扎诱导的小鼠肝纤维化模型,与对照组比较,研究HLF调控肝纤维化的作用；2.利用HLF转座敲除小鼠建立DEN诱导的小鼠肝癌模型,通过与对照组小鼠相比较,研究HLF调控肝癌发生的作用；3.构建过表达和干扰HLF的质粒,并利用慢病毒系统建立稳定过表达及干扰HLF的肝癌细胞系SMMC-7721 micro -HLF、MHCC-LM3 micro -HLF、97H micro-HLF、SMMC-7721 flag -HLF、MHCC-LM3 flag -HLF及其对照细胞系；4. SMMC-7721 micro -HLF、MHCC-LM3 micro -HLF、97H micro -HLF、 SMMC-7721 flag -HLF、MHCC-LM3 flag -HLF及其对照细胞系分别采用CCK-8实验、细胞周期检测、平板克隆实验、划痕实验、Invasion chamber迁移和侵袭实验观察过表达及干扰HLF后对肝癌细胞生长和转移等生物学特性的影响；5.将MHCC-LM3 Cobimetinib小白鼠 micro

-HLF及其对照细胞分别接种裸鼠皮下,观察HLF对肝癌细胞体内增殖能力的影响；6.将97H micro -HLF、MHCC-LM3 flag -HLF及其对照细胞分别进行裸鼠尾静脉注射,建立小鼠肝癌肺转移模型,观察HLF对肝癌细胞体内转移能力的影响。7.分离HLF组成性转座失活小鼠及对照小鼠原代肝星状细胞,利用CCK-8实验、划痕实验等方法观察HLF对肝星状细胞活化的影响;8.构建过表达HLF的腺病毒,感染人肝星状细胞系LX-2,采用CCK-8实验、细胞周期检测、Transwell实验等方法,观察过表达HLF对肝星状细胞增殖、迁移、分泌等生物学特性的影响；9.利用Realtime-PCR, western-blot、免疫共沉淀、表达谱芯片、ChIp-seq等方法研究HLF对c-Jun、p21和IL-6/STAT3及PTEN/Akt等信号通路的调控；10.利用RT-PCR, western-blot及免疫组化等方法检测肝纤维化临床样本中HLF的表达情况并运用统计学方法分析HLF的表达与临床病人肝纤维化程度的相关性；11.利用RT-PCR, western-blot及免疫组化等方法检测肝癌临床组织样品中HLF的表达情况并运用统计学方法分析HLF的表达与临床病理和预后资料的相关性。研究结果：1.以CCl4和胆管结扎诱导的小鼠肝纤维化为模型,我们研究发现与野生型小鼠相比较,HLF敲除小鼠的肝纤维化明显减轻。2.分离原代小鼠肝星状细胞进行试验我们发现,与野生型小鼠相比HLF敲除小鼠肝星状细胞的增殖、迁移和分泌能力显著下降。3.将表达HLF的腺病毒感染肝星状细胞后进行RT-PCR、western blot和免疫组化检测发现,HLF可通过调控IL-6/STAT3信号通路促进肝纤维化。4.机制研究的结果还发现,肝星状细胞中HLF的表达受TGF-3调控。5.通过对带有详细病理资料的人肝纤维化组织进行HLF的western-blot及免疫组化检测并评分发现,HLF的表达与肝纤维化的程度呈正相关。6.利用经典的DEN诱癌模型我们发现,HLF敲除组小鼠肝癌发生率明显降低,形成肿瘤的数量和体积也显著低于对照组小鼠,提示HLF对肝癌发生具有促进作用。7.通过对DEN诱癌小鼠的肝癌与癌旁组织进行表达谱芯片分析发现,与对照小鼠相比,HLF敲除小鼠的肝脏癌组织中AP-1家族的表达差异最大,western 更多 blot检测的结果验证了这一发现,这提示HLF可能通过调控c-Jun促进肝癌的发生。8.在肝癌细胞中过表达或干扰HLF后进行增殖、周期、平板克隆形成及裸鼠荷瘤实验发现,HLF可促进肝癌细胞增殖和裸鼠成瘤能力。9.在肝癌细胞中过表达或干扰HLF后进行划痕实验、Transwell、Invasion chamber、裸鼠肺转移检测,结果发现HLF可促进肝癌细胞的体内外迁移和侵袭的能力。10.通过对过表达HLF肝癌细胞系及其对照细胞系进行免疫共沉淀、westernblot蛋白电泳、RT-PCR以及裸鼠皮下荷瘤及裸鼠肺转移灶上的免疫组化染色分析发现,HLF可通过调控p21信号通路促进肝癌细胞的增殖,通过调控PTEN/AKT信号通路促进肝癌细胞的转移。11.

0001)。与对照组相比，在GIST-T1中转染miR-218mimic48h后，细胞中miR-218的表达显著上升(p<0.01)。MTT结果显示：在GIST-T1细胞中过表达miR-218后，细胞活力显著下降(p<0.01)。流式细胞仪分析结果显示：过表达miR-218后，细胞的增殖指数明显下降(p<0.01)；细胞的凋亡显著增加(p<0.01)。transwell侵袭小室检测结果显示：增强miR-218的表达后，穿过transwell小室的细胞数显著降低(p<0.01)。与对照组相比，在GIST430细胞中转染miR-218mimic48h后，细胞中miR-218的表达显著上升(p<0.01)，转染miR-218inhibitor后，miR-218的表达明显下降(p<0.01)。与对照组相比，在GIST882细胞中转染miR-218mimic48h后，细胞中miR-218的表达显著上升(p<0.01)，转染miR-218inhibitor后，miR-218的表达明显下降(p<0.01)。MTT和流式细胞仪检测结果显示：在甲磺酸伊马替尼作用下的GIST882细胞中抑制miR-218表达后，细胞活力明显上升(p<0.01)，细胞凋亡数明显减少(p<0.05)；而在甲磺酸伊马替尼作用下的GIST430细胞中miR-218过表达后，细胞活力明显下降(p<0.01)，细胞凋亡数明显增加(p<0.01)；促进细胞凋亡(p
第一部分PI3K/AKT/mTOR信号转导通路在弥漫大B细胞淋巴瘤中的活化及临床意义

FK228分子重量 弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）是最常见的非霍奇金淋巴瘤，占国外新发淋巴瘤病例的30%，占中国新发淋巴瘤病例的40-50%。针对肿瘤信号通路的研究可以更好地理解DLBCL的分子生物学发病机制，并开发新的靶向治疗手段。我们研究了DLBCL病理标本中PI3K/AKT/mTOR通路关键蛋白的表达及其与临床预后的联系。在DLBCL细胞株中评估了利妥昔单独及联合PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂雷帕霉素的抗肿瘤效果。共有73例患者的病理学组织标本受检，包括45例男性和28例女性，年龄分布为18-78岁（平均年龄50岁）。P-AKT阳性标本为40例（54.8%），p-p70S6K阳性标本为34例（46.6%），p-4E-BP1阳性标本为33例（45.2%）。p-AKT表达与临床疗效呈负相关。在CHOP治疗组中p-AKT阳性患者PFS和OS较p-AKT阴性患者低；R-CHOP组中无明显统计学差异。DLBCL细胞中存在PI3K/AKT/mTOR信号通路的异常活化，p-AKT和p-mTOR及其下游主要效应蛋白p-p70S6K和p-4E-BP1的高表达。利妥昔联合mTOR抑制剂雷帕霉素能增加对该通路的抑制作用。总之，PI3K/AKT/mTOR信号转导通路在DLBCL中异常活化与疾病的发生发展密切相关，并且是预后的不良因素。PI3K/AKT/mTOR异常活化的患者疾病进展迅速，对治疗反应差，生存期短。利妥昔可下调PI3K/AKT/mTOR通路活性，减少该通路对疾病的不良影响。利妥昔联合PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂有望成为DLBCL新的靶向治疗手段。

GSK126 第二部分利妥昔联合everolimus靶向AKT/mTOR途径治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的临床前研究 本研究评估了抗CD20单抗利妥昔联合mTOR特异性抑制剂everolimus的抗肿瘤效果。与利妥昔及everolimus单药相比，两药联合可更有效地抑制细胞增殖，具有明显的协同抗肿瘤效应，能显著下调AKT、mTOR及下游效应分子。联合处理组肿瘤细胞发生明显G0/G1期阻滞，凋亡细胞比例增高。利妥昔可下调p-AKT表达，避免抑制mTOR引起的AKT负反馈性激活，从而进一步下调mTOR通路活性。利妥昔联合everolimus在动物模型上同样具有明显的协同抗肿瘤效应。本研究为临床采用利妥昔-everoliums联合方案治疗DLBCL提供了理论依据。 为什么 第三部分PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235靶向治疗弥漫大B细胞淋巴瘤的体外研究 目的：在体外水平研究新型PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株的靶向作用及机制。方法：采用CCK-8法检测NVP-BEZ235对弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB增殖的影响，流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡，蛋白印迹法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路靶蛋白、细胞周期/凋亡相关分子的变化。结果：NVP-BEZ235可呈剂量依赖性地抑制弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB的增殖；使细胞周期阻滞于G0/G1期，并诱导细胞凋亡；蛋白印迹法显示NVP-BEZ235能抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路中关键分子的活性，下调细胞周期相关蛋白和抗凋亡蛋白，上调促凋亡蛋白。结论：PI3K/mTOR双重抑制剂NVP-BEZ235可在体外水平抑制弥漫大B细胞株SUDHL-4和DB的生长，使细胞周期阻滞在G0/G1期，并诱导细胞凋亡，有望成为的DLBCL新的靶向治疗药物。
20(S)-原人参二醇（Protopanxadiol, PPD）是从西洋参（Panax quinquefoliumL.）茎叶总皂苷中提取、分离、转化而得到的人参二醇组皂苷元，分子式为C30H52O3，相对分子质量为460.

研究内容第一部分高迁移率族蛋白B1对严重烧伤大鼠KCs分泌促炎性细胞因子的影响 实验使用健康成年雄性SD大鼠32只，体重200-250g，购自安徽医科大学动物中心。大鼠实验前进行一周环境适应。大鼠分为A组（烫伤组）及B组（假烫组），A组大鼠(16只)予戊巴比妥（30mg/kg）腹腔内注射麻醉，剃除背部毛发，大鼠背部置于98℃的热水中浸润12秒，获得总体表面积（TBSA）30%的Ⅲ°烫伤模型（经病理切片证实，以下称烧伤）。烧伤后立即给予每只大鼠腹腔注射乳酸林格氏液（30ml/kg）复苏；假烫组（16只）大鼠予同样的处理，但给予室温水水浴且不予液体复苏。各组大鼠于烧伤或假烫后24h行心脏取血处死。采用肝脏原位灌注、密度梯度离心和选择性粘附法分离KCs。分别经锥虫蓝染色和乳胶微粒吞噬实验判断和鉴定。KCs活性和纯度均大于95%以上。分离后的KCs以1×10~6每孔的密度接种于24孔板中。A、B两组大鼠KCs各分为4组，分别接受不同浓度HMGB1（0、50、100、200ng/mL）刺激48h。收集细胞培养的上清液，使用大鼠TNF-α和IL-1β酶联免疫吸附试剂盒（美国BioSource公司）检测，相关操作按照生产商提供的说明书实行。

BMS754807 第二部分RAGE受体在高迁移率族蛋白B1诱导严重烧伤大鼠KCs分泌促炎性细胞因子中的作用 健康成年雄性清洁级SD大鼠32只，体质量200~250g，购自安徽医科大学实验动物中心。大鼠常温下饲养1周，20g/L戊巴比妥钠腹腔注射（30mg/kg）麻醉后，背部置于98°C水中12s，造成30%TBSA Ⅲ度烫伤（经病理切片证实，以下称烧伤），烧伤后立即给予乳酸林格液腹腔注射（30mL/kg）进行液体复苏。伤后24h行心脏取血处死大鼠，采用肝脏原位灌注、不连续密度梯度离心和选择性粘附法分离KCs。分别经锥虫蓝染色和乳胶微粒吞噬实验判断和鉴定。KCs活性和纯度均大于95%以上。（1）取部分细胞按随机数字表法分为2组，各组样本数为8：①PBS对照组，加入1mL 为什么 PBS液培养；②HMGB1刺激组，加入1mL浓度为100ng/mL HMGB1刺激。培养48h后行RAGE检测。（2）另取部分细胞按随机数字表法分为4组，各组样本数为8：①对照组，加入1mL PBS液培养；②HMGB1组，加入1mL浓度为100ng/mL HMGB1培养；③HMGB1＋抗RAGE抗体组，经1mL浓度为20μg/mL抗大鼠RAGE单克隆抗体孵育2h后，加入1mL浓度为100ng/mL HMGB1刺激；④HMGB1＋重组大鼠RAGE/Fc嵌合体（rrRAGE/Fc）组，0.5mL浓度为100ng/mL HMGB1与0.5mL浓度为5μg/mLrrRAGE/Fc孵育2h后，作用于细胞。培养48h后行TNF-α和IL-1β蛋白和mRNA表达检测。

第三部分Toll样受体在高迁移率族蛋白B1诱导严重烧伤大鼠KCs分泌促炎性细胞因子中的作用 健康成年雄性清洁级SD大鼠32只，体质量200~250g，购自安徽医科大学实验动物中心。大鼠常温下饲养1周，20g/L戊巴比妥钠腹腔注射（30mg/kg）麻醉后，背部置于98°C水中12s，造成30%TBSA Ⅲ度烫伤（经病理切片证实，以下称烧伤），烧伤后立即给予乳酸林格液腹腔注射（30mL/kg）进行液体复苏。伤后24h行心脏取血处死大鼠，采用肝脏原位灌注、不连续密度梯度离心和选择性粘附法分离KCs。分别经锥虫蓝染色和乳胶微粒吞噬实验判断和鉴定。KCs活性和纯度均大于95%以上。分离后的KCs以每孔1×106个的密度接种于24孔板中。大鼠的KCs分离后分为四组：⑴对照组，RPMI-1640培养液中培养48h；⑵HMGB1刺激组，100ng/ml HMGB1刺激48h；⑶HMGB1+抗TLR2抗体组，20μg/ml抗TLR2抗体（美国Invivgen公司）培养2h后加入100ng/ml HMGB1刺激48h；⑷HMGB1+抗TLR4组,20μg/ml抗TLR4抗体（美国Invivgen公司）培养2h后加入100ng/ml HMGB1刺激48h。ELISA法测定KCs上清液中的TNF-α和IL-1β含量。Northern blot法检测KCs中TNF-α和IL-1β

mRNA的表达，Westernblot法检测KCs中p38及JNK的表达，EMSA法检测KCs中NF–κB活性。 四．研究结果 第一部分 来源于对照组和烧伤组大鼠的KCs分别用不同浓度的HMGB1（50-200ng/ml）处理48小时。运用ELISA法检测上清液中的TNF-α和IL-1β蛋白含量。结果表明：在正常情况下，KCs仅产生极少基础量的TNF-α和IL-1β。HMGB1通过剂量依赖的方式刺激KCs分泌TNF-α和IL-1β。此外，在至少给予50ng/ml剂量的HMGB1刺激情况下，烧伤组大鼠KCs产生TNF-α和IL-1β显著多于对照组。这种差异在使用100ng/ml或者更高浓度HMGB1刺激的实验组中更为明显。 NLG919 第二部分 培养48h后，HMGB1刺激组KCs表面RAGE表达水平（1.036±0.101）明显高于PBS对照组(0.191±0.024，t=-23.158，P=0.000)。培养48h后，与对照组比较，HMGB1组、HMGB1+抗RAGE抗体组和HMGB1+rrRAGE/Fc组KCs培养上清液中TNF-α和IL-1β含量均显著增高（P值均小于0.01），后3组组间两两比较差异均无统计学意义（P值均大于0.05）。培养48h后，与对照组比较，HMGB1组、HMGB1+抗RAGE抗体组和HMGB1+rrRAGE/Fc组TNF-α、IL-1β mRNA表达水平均显著增高（P值均小于0.01），后3组组间两两比较差异均无统计学意义（P值均大于0.05）。 第三部分 使用抗TLR2抗体或抗TLR4抗体预培养KCs都显著减少了HMGB1诱导的TNF-α和IL-1β分泌（p<0.01）。抗TLR4抗体较之抗TLR2抗体对HMGB1诱导的TNF-α产生具有更强的抑制作用（73%对53%，p0.05）。同时，TLR2阻断较之TLR4阻断更显著的抑制HMGB1诱导的IL-1β产生（80%对50%，p0.05）。 同时，KCs RNA的Northern blot分析表明：使用HMGB1刺激48小时后的KCs TNF-α和IL-1β的mRNA水平显著增加。此外，经过抗TLR2和TLR4预培养的烧伤后大鼠KCs显著抑制了HMGB1诱导的TNF-α和IL-1β的mRNAs表达(p<0.

05和P<0.01或P<0.01);槐定碱中、高剂量治疗组小鼠血清TNF-α水平均显著低于同时相点LPS模型组(P<0.01或P<0.05)。与LPS模型组比较,槐定碱三个剂量治疗组均不同程度显著下调同时相点LBP、CD14、TLR4的mRNA以及TLR4蛋白的表达;免疫组化检测槐定碱三个剂量治疗组肺组织总p38,阳性细胞数与阳性信号强度的记分值与同时相点LPS组比较均无显著差异;但磷酸化p38阳性细胞显著减少,阳性信号明显减弱,记分值均显著小于同时相点LPS模型组(P<

0.01或P < 0.05)。Western-blot检测槐定碱三个剂量组肺组织总p38蛋白表达均与模型组无显著差异,但槐定碱三个剂量治疗组2h起即有下调磷酸化p38蛋白表达的趋势,6h与12h时与同时相点模型组比较均有显著下降(P<0.01或P<0.05)。槐定碱三个剂量治疗组均不同程度显著下调c-jun和c-fos的mRNA表达(P<0.01或P<0.05)。槐定碱三个剂量治疗组TNF-αmRNA表达的动态变化与血清TNF-α类似。槐定碱三个剂量治疗组之间比较,在6h、12h及24h时相点,中、高剂量组TNF-αmRNA表达均显著低于同时相点低剂量组(P<0.01或P
目的一、通过与传统体外循环(CPB)下冠状动脉旁路移植术(CABG)患者相比较,评价采用非体外循环的方式是否有助于减轻中年CABG患者术后认知功能障碍(POCD)的发生。

此网站 查找更多 二、通过比较异丙酚复合利多卡因全凭静脉麻醉和静吸复合麻醉下非体外循环冠状动脉旁路移植术(OPCABG)患者术后的认知功能,探讨OPCABG患者适宜的麻醉管理方式。 方法一、择期拟行CABG患者60例,年龄40～64岁,心功能Ⅰ或Ⅱ级,肝、肾及肺功能未见明显异常,左室射血分数≥45%,近1个月内未发生心肌梗塞,无心衰史、心脏手术史、神经系统疾病史。随机分为非体外循环组(Ⅰ组)和体外循环组(Ⅱ组),每组30例。于麻醉诱导后经右颈内静脉穿刺向头侧置管,使导管尖端位于颈内静脉球部,分别于麻醉诱导后(基础值,T0)、术中(T1,Ⅰ组为移植血管远心端吻合完毕即刻；Ⅱ组为复温至35.5℃,松开主动脉阻断钳,心脏复跳即刻)、术毕(T2)、术后6 h(T3)和术后24 h(T4)5个时间点采集颈内静脉球部血5 ml测定血清S-100蛋白和神经元特异性烯醇化酶(NSE)浓度,测定血清肿瘤坏死因子—α(TNF-α)、白细胞介素—1(IL-1)和白细胞介素—6(IL-6)浓度,并同步采集桡动脉和颈内静脉球部血各1 ml进行血气分析,测定动脉血氧饱和度(SaO2)、动脉血氧分压(PaO2)、颈内静脉血氧饱和度(SjvO2)、颈内静脉血氧分压(PjvO2)、血红蛋白含量(Hb),根据Fick公式计算脑动静脉血氧含量差(Ca-jvO2)及脑血流量／脑氧代谢率比值(CBF/CMRO2)。分别于麻醉前1d和术后3、7 Palbociclib制造商 d时对患者进行简易智能状态检查(MMSE)评分,MMSE总分30分,0.05),术后所有患者镇痛效果均良好。所有患者均完成MMSE,Ⅰ组患者术后7d内共有4例发生认知功能障碍,发生率为13%；Ⅱ组共有11例发生认知功能障碍,发生率为37%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者血清S-100蛋白和NSE浓度于T1时开始升高(P<0.05),T2时达到高峰(P<0.05),T3时已出现下降趋势,但仍高于基础值(P0.05),但Ⅱ组T4时血清S-100蛋白和NSE浓度仍高于基础水平(P<0.05)；与Ⅰ组比较,T1～T44个时点Ⅱ组血清S-100蛋白和NSE浓度均升高(P<0.05)。两组患者T3和T4时点Pa02均低于同组基础水平(P<0.05),Ⅱ组T1时点Pa02高于基础水平(P<0.05)；与Ⅰ组比较,T1时点Ⅱ组PaO2升高(P<0.05)。两组患者SjvO2和PjvO2在T1时点均低于同组基础水平(P0.05)；与Ⅰ组比较,T1时点Ⅱ组SjvO2和PjvO2均降低(P<0.05)。两组患者T3和T4时点Hb均低于同组基础水平(P<0.05),Ⅱ组T1时点Hb低于基础水平(P<0.05)；与Ⅰ组比较,T1时点Ⅱ组Hb降低(P<0.05)。两组患者T1时点Ca-jvO2均高于同组基础水平(P<0.05),T3和T4时点Ca-jvO2均低于同组基础水平(P<0.05)；与Ⅰ组比较,T1时点Ⅱ组Ca-jvO2升高(P<0.05)。与Ⅰ组比较,Ⅱ组T1～T4时点血清TNF-α、IL-1和IL-6浓度升高(P<0.05)；与T0时点比较,Ⅰ组T3时点、Ⅱ组T1～T4时点血清IL-1和IL-6浓度升高(P0.05),术后所有患者镇痛效果均良好。两组患者均完成MMSE,

S组患者术后7d内共有8例发生认知功能障碍,发生率为27%；P+L组共有2例发生认知功能障碍,发生率为7%,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患者血清S-100蛋白和NSE浓度于手术开始后升高,T1时达到高峰(P<0.05),T2时已出现下降趋势,但仍高于基础值(P0.

Furthermore,Western blot analysis showed that the expres-sion of phosphorylated ERK was increased by silibinin,the expression of phos-phorylated p38 MAPK was decreased and total ERK,p38,JNK and phosphory-lated JNK MAPK did not change after treatment with both isoproterenol andsilibinin.Furthermore,pretreatment of cardiac myocyte with PKC,Ras and Rafinhibitors significantly

blocked ERK phosphorylation.Conclusion:Silibinin issuggested to protect isoproterenol-induced rat cardiac myocyte apoptosis byactivating the tyrosine kinase pathway,PKC 无 and MAPK pathways.
Aim:To investigate the effect of icariin on the expression of peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1 alpha (PGC-1 α),peroxisome proliferator-activated receptor alpha (PPARα),and nuclear

respiratory factor 1 (NRF-1) oncardiomyocyte differentiation of murine embryonic stem (ES) cells in vitro.Methods:The Selleckchem STI571 cardiomyocytes derived from murine ES cells were verified byimmunocytochemistry using confocal laser scanning microscopy.Cardiac-specific sarcomeric proteins (ie α-actinin,troponin T) were evaluated when em-bryoid bodies (EB) were treated with icariin or retinoid acid.The expression ofPGC-1α,PPARα,and NRF-1 were analyzed using both semiquantitative RT-PCRand Western blotting in cardiomyocyte differentiation.The phosphorylation ofthe p38 mitogen-activated protein kinase (MAPK) was studied in the differentia-tion process,and its specific inhibitor SB203580 was employed to confirm thefunction of the p38 MAPK on icariin-induced cardiac differentiation.Results:The application of icariin significantly induced the cardiomyocyte differentiationof 无 EB as indicated by the promoted expression

of α-actinin and troponin T.Theexpression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 increased coincidently in early differ-entiation and the increase was dose-dependently upregulated by icariin treatment.The phosphorylation of the p38 MAPK peaked on d 6 and decreased after d 8,andthe activation was further enhanced and prolonged when the EB were subjectedto icariin,which was concurrent with the elevation of PGC-1α,PPARα,and NRF-1.Moreover,the inhibition of the p38 MAPK pathway by SB203580 efficientlyabolished icariin-stimulated cardiomyocyte differentiation and resulted in the cap-ture of the upregulation of PGC-1α,PPARα,and NRF-1.Conclusion:Takentogether,icariin promoted the expression of PGC-1α,PPARα,and NRF-1 duringcardiomyocyte differentiation of murine ES cells in vitro and the effect was partlyresponsible for the activation of the p38 MAPK.
Aim:To investigate the effect of aspirin on the apoptosis of cultured bovineaortic endothelial cells(BAEC)and the signal pathways involved in this process.Methods:BAEC were cultured and passaged in Dulbecco’s modified Eagle’smedium culture medium.

Rab23对鳞癌Sa3细胞生长增殖的影响 1)选取口腔鳞癌Sa3细胞株，构建稳定过表达和干涉Rab23的Sa3细胞株；Western blot实验检测Rab23表达。结果显示：过表达Rab23组融合蛋白转染成功，干涉Rab23组，其表达较空载体组下降； 2)平板克隆形成实验检测Rab23对Sa3细胞增殖的影响。结果显示：过表达Rab23组较对照组相比，细胞增殖能力降低，干涉Rab23组较空载体组相比细胞增殖能力明显提高； 3)流式细胞仪检测Rab23对Sa3细胞周期的影响。结果显示：过表达Rab23可引起Sa3细胞G1期阻滞，影响细胞周期进程； 4) CCK8实验检测Rab23对Sa3细胞生长的影响。结果显示：与对照组相比，过表达Rab23组细胞生长能力降低，干涉Rab23组生长能力增高。

2. Rab23抑制鳞癌Sa3细胞生长增殖机制的初步探讨 1) Western blot检测Rab23对Hedgehog信号通路分子Gli1、Gli2表达的影响。结果显示：稳定转染过表达Rab23组和干涉Rab23组其Hedgehog信号通路重要的转录因子Gli1、Gli2表达水平与对照组和空载体组相比未见明显变化； 2) Western blot检测Rab23对细胞Erk1/2、p-Erk1/2表达的影响。结果显示：过表达Rab23组和干涉Rab23组较对照组和空载体组相比Erk1/2表达水平无明显变化；与对照组相比，过表达Rab23组p-Erk表达水平降低，而干涉Rab23组较空载体组相比p-Erk表达水平升高。 3) Western blot检测Rab23对细胞周期相关蛋白表达的影响。结果显示：CyclinE在各组细胞中的表达水平未见明显变化；与对照组相比，过表达Rab23组Cyclin D1表达水平降低，而干涉Rab23组较空载体组相比Cyclin 没有 D1表达水平升高。 主要结论： 1) Rab23对鳞癌Sa3细胞的生长增殖具有抑制作用； 2) Rab23可能不通过Hedgehog信号通路来抑制鳞癌Sa3细胞的生长增殖； 3) Rab23抑制鳞癌Sa3细胞生长增殖可能是通过调控Erk MAPKs信号通路发挥作用； 4) Rab23下调鳞癌Sa3细胞周期蛋白Cyclin D1的表达引起Sa3细胞G1期阻滞，从而对细胞周期进程产生影响。
目的： 建立Walker-256大鼠移植性肝癌模型后切除肿瘤并植入自制门静脉泵,经泵灌注不同剂量Licartin并联合灌注化疗(FOLFOX方案),评价这种联合用药方案的安全性、有效性和可行性,从而为这种新疗法的临床应用提供实验理论基础。

已经 材料与方法： 选取雄性SD大鼠100只,将含有大量Walker-256中瘤细胞的浓缩腹水种植于大鼠肝脏的左外叶。一周后通过CT扫描,选取瘤体直径在2.0-3.0cm的大鼠,切除肿瘤后植入自制门静脉泵。7天后将存活大鼠随机分为A、B、C三组。A组(小剂量Licartin+PVIC组)：通过门静脉泵灌注Licartin (2.5mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案)；B组(大剂量Licartin+PVIC组)：通过泵灌注Licartin(5.0mCi/kg)+灌注化疗(FOLFOX方案)；C组(PVIC组)：通过泵行灌注化疗(FOLFOX方案)。每次手术前后均观察大鼠一般情况,抽血查血常规、肝肾功能和甲状腺功能。行CT扫描了解肿瘤生长和转移情况,A、B组行SPECT扫描检测核素分布情况。大鼠死亡后切取肝、肺和其他转移灶行病理学检查。观察所有大鼠生存资料进行生存分析。 结果： 那个 本研究共进行了肝癌种植术、肝癌切除和门静脉泵植入术及经门静脉泵灌注术三次实验,术程基本顺利,麻醉满意,术后恢复情况良好。整个实验过程中大鼠体重呈现下降趋势。

注射法种植肝癌简单易行,成瘤率为95.7%。切除肿瘤并植入门静脉泵后术后一周共46只大鼠行灌注术(其中A组18只,B组18只,C组10只)。 灌注术后血常规检查提示术后7dA组和B组WBC计数明显降低,而且B组WBC计数又低于A组和C组(P=0.043),C组计数基本正常。术后14d计数均基本回归正常。RBC计数和PLT计数变化不大(P>0.05)。 肝功能检查显示灌注术后Id AST和ALT计数都明显上升(P值分别是0.024和0.104),A组和B组计数高于C组,而且B组ALT计数还高于A组(P0.05)。肾功能检查发现BUN和Cr计数在灌注术前后基本无大变化(P>0.05)。 甲状腺功能检查发现A组和B组术后7d FT3、FT4计数明显低于术前(P值均<0.001),TSH明显高于术前(P<0.001),B组甲状腺功能损伤明显高于A组(P0.05)。 术后5min SPECT扫描显示未见核素在肝脏内明显浓聚,甲状腺内富集大量核素。术后21d对于肿瘤明确复发的大鼠行SPECT扫描显示核素在肝肿瘤区域大量富集。 肝癌种植术后一周行CT扫描发现63%的大鼠瘤体直径在2.0-3.0cm之间。灌注术后21d CT扫描发现B组复发和转移最少,A组次之,C组最多,但是分组治疗和TNM分期二者之间并没有关系(P=0.371)。 病理学检查见肝肿瘤核分裂象增多,异型性明显,瘤细胞弥漫密集分布。免疫组化检查显示AFP阴性,CEA阴性,Hepa阴性,Glypican-3阴性(局灶±),Ki-67阳性(比例约40%)。 所有大鼠都在灌注术后48天内死亡。生存状况分析显示三组大鼠的MST分别为27d、39d和24d,其中B组生存时间长于A组和C组(P
目的:原发性肝癌(primary hepatic carcinoma，PHC)是一种常见的恶性肿瘤。目前对于肝癌的发病机制仍不清楚。近年来，由于干/祖细胞学说的提出，有学者认为肝癌可能起源于肝干/祖细胞。本文选择ATP结合转运蛋白G家族成员2(ATP-binding cassette superfamilyG2,ABCG2)为干细胞标志物，探讨ABCG2在肝细胞癌、癌旁组织及正常肝组织中的表达，及其与患者临床病理特征之间的关系及其预后作用。 方法:收集桂林医学院附属医院肝胆胰外科2009年5月～2012年7月手术切除的60例肝细胞癌（HCC)、60例癌旁和7例正常肝组织标本，其中男性42例，女性18例，年龄30～68岁，中位年龄50.

在转录水平研究罗格列酮对炎症介质生成的影响,用RT-PCR的方法检测BV-2细胞内TNF-a和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)的基因表达变化。 2.在蛋白水平探讨罗格列酮对炎症反应标志性蛋白的影响,用Western blot的方法检测LPS和罗格列酮作用前后iNOS的表达变化。 3.在转录因子水平探讨罗格列酮的抑制作用是否与NF-κB的活化有关,用Western的方法检测LPS和罗格列酮作用前后IκBα (NF-κB抑制蛋白)和磷酸化NF-κB p65的表达变化,并用免疫荧光染色的方法检测NF-κB p65核移位的变化。 4.在信号转导通路水平探讨罗格列酮对丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated 和 protein kinases, MAPKs)三条信号通路(p38MAPK、 JNK和ERK)激活的影响,用Western的方法检测LPS和罗格列酮作用前后三条通路的磷酸化情况,分析罗格列酮发挥抑制作用可能的途径。

结果： 1.LPS激活BV-2细胞后, TNF-a和iNOS的基因表达显著上调,炎症反应的标志性蛋白iNOS表达增多；应用罗格列酮后,TNF-a和iNOS的基因表达明显下降,TNF-a和iNOS蛋白表达受到抑制,以上结果表明罗格列酮可以在转录水平和蛋白水平抑制炎症介质的产生。 2. NF-κB是机体调控免疫炎症反应的重要转录因子。Western检测发现：LPS激活BV-2细胞后,IKBα表达降低,罗格列酮可以部分恢复IKBα的表达：LPS可以诱导磷酸化NF-κB p65的水平显著升高,罗格列酮作用后可以抑制其升高。另外,NF-κB激活后其p65亚基需进入细胞核与相应DNA特定序列结合而启动炎症介质的表达,免疫荧光染色显示提示罗格列酮可抑制NF-κB的核移位,以上实验结果提示罗格列酮减少炎症介质的释放与抑制NF-κB通路的激活关系密切。

VE-821浓度 3. MAPKs是与炎症反应密切相关的信号通路,LPS激活BV-2细胞后,p38MAPK、 JNK和ERK通路均发生激活,罗格列酮抑制了p38MAPK和JNK通路的激活,而对ERK的激活无显著影响,说明在信号转导水平,罗格列酮可能通过抑制p38MAPK和JNK通路而发挥抗炎作用。 结论： 罗格列酮可以抑制活化BV-2细胞炎症介质的基因转录,并抑制炎症反应蛋白的表达；在转录因子水平罗格列酮可通过抑制NF-κB活化与核移位而发挥作用；在信号转导水平罗格列酮可通过抑制p38MAPK和JNK的激活而发挥抑制BV-2细胞活化的作用。 总结 本研究利用体外PD炎症模型,系统研究了PPARγ激动剂罗格列酮对小胶质细胞活化的抑制作用及对多巴胺能神经元的保护作用,首次阐明罗格列酮通过抑制NF-κB、 p38MAPK和JNK通路的激活而发挥抗炎作用。另外,本研究首次利用小胶质细胞系BV-2细胞的条件培养液在MN9D细胞上模拟了炎症损伤,直观显示了炎症介质对多巴胺能神经元造成的氧化应激和线粒体功能障碍,两者是导致多巴胺能神经元退变凋亡的主要机制,并证实罗格列酮抑制炎性介质释放与保护多巴胺能神经元的高度相关。本研究深化了罗格列酮抑制小胶质细胞活化药理机制的认识,为TZDs类药物治疗PD提供了新的实验依据。
研究背景： 神经系统疾病是全球首位致残疾病和第3位主要致死因素。如脑中风会引起大脑损伤区域神经元和神经元连接广泛缺失,导致长期的神经功能障碍。目前药物干预主要局限在急性期的脑损伤保护,如重组组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)仅适合于急性期恢复脑供血等。尚不能对中风引起的长期神经功能障碍起到有效的治疗和恢复作用。因此,寻找能有效恢复损伤后亚急性其和慢性期神经功能的治疗方法,药物或保健食品意义都非常重大

selleck kinase抑制剂 在我国,海参一向被视为药食两用的海产佳品,其中尤以剌参为佳。刺参广泛应用于年老体弱者,记忆力减退着,中风患者术后以及神经退行性疾病患者的保健和恢复。可见刺参对预防神经衰退,增强和恢复神经组织功能发挥积极作用,且食用刺参没有副作用。所以,深入研究刺参活性成分的药理作用对发挥刺参在维护人民身体健康方面具有重要的意义,同时也为刺参产业的发展起积极的作用。本研究从刺参体壁中分离获得具有药理活性的刺参多糖,探讨其对神经细胞的作用方式及其作用机制。 实验方法： 1.刺参多糖的分离纯化、活性筛选和理化性质鉴定 实验采用为蛋白酶/胰蛋白酶双酶解法,乙醇沉淀获得粗多糖,大孔吸附树脂脱色,用DEAE-sepharose阴离子交换柱分离,获得A、B、C、D四个多糖组分,用Sephacryl S-200凝胶进一步春华并脱盐。将分离获得的组分分别用神经干细胞球迁移实验(HS-3活性最好)和星形胶质细胞活化进行活性筛选(HS-4活性最好)。选取有活性的单一糖组分进行理化性质鉴定，采用HPLC法做纯度检查，自动旋光仪检测比旋光度，苯酚硫酸法检测总糖含量，硫酸咔唑法检测糖醛酸含量,明胶BaCl2法检测硫酸根含量, Bradford法检测蛋白质含量,凝胶色谱法检测多糖分子量。 2、HS-3促进神经干细胞球迁移作用研究。 本实验从孕14.

Chemotherapy remains the mainstay of treatment for these patients but it confersonly a moderate survival advantage. There remains

a need for new targeted treatment options and a way to better define patient populations who will benefit from these agents. In the past few years, there has been a better understanding of the biology, molecular profiling, and heterogeneity of gastric cancer. Our increased knowledge 购买Buparlisib has led to the identification of gastric cancer subtypes and to the development of new targeted therapeutic agents. There are now two new targeted agents, trastuzumab and ramucirumab, that have recently been approved for the treatment of advanced and metastatic gastric cancer. There are also many other actively investigated targets, including epidermal growth factor receptor, the phosphatadylinositol 3-kinase/protein kinase B/mammalian target of rapamycin pathway, c-Met, poly ADP-ribose polymerase, and immune checkpoint inhibition. In this review, we discuss the current management of advanced gastric cancer as well as emerging targeted therapies and immunotherapy.
通过对非小细胞肺癌(NSCLC)生物标志物的监测,能指导临床有效诊断疾病,提高治疗效果,降低其他治疗方式产生的毒副作用,并能改善预后,预测疾病的复发和耐药性的产生。本文通过检索数据库,总结归纳了近年来新发现及常用于NSCLC预测疾病进程、预后及指导药物靶向治疗、放化疗的生物标志物,以期为指导NSCLC患者个体化治疗及疾病诊断、调整治疗方案提供依据和参考。
分子伴侣热休克蛋白90(heat shock

protein 90,HSP90)能够通过泛素化途径保护细胞内蛋白质功能,其在肿瘤细胞中呈过表达状态,维持肿瘤细胞生长、增殖、抗凋亡及转移能力。Ganetespib是目前广泛应用于多种肿瘤治疗临床试验的小分子HSP90抑制剂,其单药具有高效能的抗肿瘤活性,联合用药能增强标准化疗或其他靶向治疗疗效,且能同时克服多种肿瘤的耐药机制,本文就Ganetespib在多种人类恶性实体肿瘤治疗中的疗效进行讨论。
表皮生长因子受体是一种具有酪氨酸激酶活性的膜受体,在细胞的增殖、迁移、代谢、分化和存活中发挥重要作用。目前,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(epidermal http://www.selleckchem.cn/products/MG132.html growth factor receptor-tyrosine kinase inhibitors,EGFR-TKIs)的开发已成为肿瘤治疗领域的热点。EGFR-TKIs分为可逆性EGFR-TKIs和不可逆性EGFR-TKIs,可逆性EGFR-TKIs主要包括吉非替尼和厄洛替尼等已上市的药物,不可逆性EGFR-TKIs主要包括阿法替尼和一些正处于临床研究中的药物,如AZD9291、CO-1686和HM61713等。本文对EGFRTKIs的研究进展进行了综述,为非小细胞肺癌临床治疗的药物选择提供参考。
The

discrepancy between the surgical technique and the type of adjuvant chemotherapy used in clinical trials and patient outcomes in terms of overall survival rates has led to the generation EPZ-6438核磁共振 of different adjuvant treatment protocols in distinct parts of the world.The adjuvant treatment recommendation is generally chemoradiotherapy in the United States,perioperative chemotherapy in the United Kingdom and parts of Europe,and chemotherapy in Asia.These options mainly rely on the United States Intergroup-0116,United Kingdom British Medical Research Council Adjuvant Gastric Infusional Chemotherapy,and the Asian Adjuvant Chemotherapy Trial of S-1 for Gastric Cancer and Capecitabine and Oxaliplatin Adjuvant Study in Stomach Cancer trials.However,the benefits were evident for only certain patients,which were not very homogeneous regarding the type of surgery,chemotherapy regimens,and stage of disease.Whether the dissimilarities in survival are attributable to surgical technique or intrinsic biological differences is a subject of debate.

Western-blot证实胃泌素、曲妥珠单抗可协同下调SGC7901细胞中p16、AE1、CyclinD1、β-catenin蛋白表达,上调AE2蛋白,降低胞浆内p16蛋白并促进其入核。 5.裸鼠荷瘤实验显示胃泌素、曲妥珠单抗在体内亦有协同抗肿瘤作用,荷瘤免疫组织化学染色显示联合用药组细胞膜CCKBR蛋白表达较单药组明显增多,荷瘤组织提取蛋白做Western-blot示胃泌素、曲妥珠单抗在体内亦协同下调p16、AE1、CyclinDl蛋白、上调AE2蛋白,与体外实验结果一致。 结论： 1.胃泌素、曲妥珠单抗的体内、体外实验均证实对胃癌有协同抗肿瘤作用,并首次发现曲妥珠单抗在HER2阴性的胃癌细胞中同样具有协同抑癌作用。 2.胃泌素、曲妥珠单抗协同上调CCKBR蛋白表达并促进其膜定位,上调的CCKBR与胃泌素相结合启动并放大对下游信号分子的影响可能是胃泌素与曲妥珠单抗协同抗肿瘤增殖的关键环节。

3.上调的CCKBR与胃泌素结合后可影响AE1/p16/AE2复合体,使胞浆内p16减少、入核增加,AE1下调,AE2上调,细胞酸化,Wnt/β-catenin通路失活,CyclnD1下降,最终阻滞细胞于G1期从而抑制肿瘤细胞增殖。
目的：探讨mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在新疆维、汉乳腺癌组织中的分子病理学机制。方法：随机选取285例于2005年3月-2009年9月期间就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院的维吾尔族、汉族女性浸润性乳腺癌患者,检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的表达状况,分析其与各临床指标之间的关系及对预后的影响；选取46对维、汉新鲜乳腺癌组织和癌旁组织样本,使用免疫印记(Western-blot)蛋白方法检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的表达情况,并测定其相对定量。选取63对维、汉新鲜乳腺癌组织和癌旁组织样本,检测mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1mRNA的表达情况,并与蛋白检测的结果进行对照。结果：p-mTOR的表达阳性率分别是72%(206/285)和60%(170/285),,p=0.001；p-4EBP1的表达阳性率分别是26%(74/285)和8%(24/285),,p=0.000；p-S6K1的表达阳性率分别是42%(120/285)和18%(50/285),p=0.000,p值均小于0.01,差别均有显著统计学差异。三指标与各临床指标的单因素分析显示均与无病生存率无明显统计学差异,多因素分析显示不同民族(p=0.000)、BMI指数(p=0.048)、ki-67的表达(p=0.004)以及p-S6K1的表达(p=0.000)与无病生存率相关。无病生存的Log

Saracatinib数据表 无 Rank检验的X2值分别为0.274,0.920和0.144,p值分别为0.619,0.337和0.704, p-mTOR、 p-4EBP1、p-S6K1的表达与无病生存率之间无明显统计学差异。在维吾尔族和汉族乳腺癌组织中,p-mTOR的表达阳性率分别是54%和46%(p=0.067), p-4EBP1的表达阳性率分别是62%和38%(p=0.020), p-S6K1的表达阳性率分别是49%和51%(p=0.695)。荧光定量rtPCR结果显示,mTORmRNA在乳腺癌组织和癌旁组织中表达的2-△△ct平均值分别是14.83、19.78, t=-1.376, p=0.174; S6K1mRNA在乳腺癌组织和癌旁组织中表达的2-ΔΔct平均值分别是66.06,87.51, t=-1.15, p=0.254;4EBP1mRNA在乳腺癌组织和癌旁组织中表达的平均值分别是12.70、10.33,t=0.379,p=0.706,三者差异均无明显统计学意义(p>0.05)。维、汉乳腺癌组织中mTORmRNA2－ΔΔct平均值分别为10.88和19.7,差异有统计学意义(p=0.045),4EBP1mRNA2－ΔΔct平均值分别为52.72和80.74,差异无统计学意义(p=0.128),S6K1mRNA2-－ΔΔct平均值分别为7.97和17.92,差异无统计学意义(p=0.404)。结论：mTOR信号通路及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌组织中被显著激活。磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1表达的调控位点可能位于转录后水平或蛋白质水平。p-4EBP1在维吾尔族中的表达显著升高,可能成为研究维、汉不同民族之间乳腺癌差异的原因之一。维、汉之间mTOR及其下游分子mRNA与磷酸化蛋白检测的结果不一致,因而mRNA的检测不能代表维、汉乳腺癌中mTOR信号通路的激活状态。

Selleckchem STI571 第一部分：mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌中的表达和临床意义 目的：探讨磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌组织和癌旁组织中的表达部位、表达量以及蛋白表达的相关性。探讨磷酸化mTOR、4EBP1和S6K1在浸润性乳腺癌患者当中与各临床指标以及预后的关系。方法：随机选取285例于2005年3月-2009年9月期间就诊于新疆医科大学附属肿瘤医院的维吾尔族、汉族女性浸润性乳腺癌患者,使用免疫组化检测磷酸化mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的表达状况及其相互关系,以及与各临床指标之间的关系及对预后的影响；选取46对维、汉新鲜乳腺癌组织和癌旁组织样本,使用免疫印记检测mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的表达情况,并测定其相对定量,分析mTOR及其下游分子4EBP1和S6K1的相互关系。结果:p-mTOR表达阳性率分别是72%(206/285)和60%(170/285), p=0.001; p-4EBP1的表达阳性率分别是26%(74/285)和8%(24/285),p=0.000；p-S6K1的表达阳性率分别是42%(120/285)和18%(50/285),p=0.000,p值均小于0.01,差别均有显著统计学差异。p-mTOR在癌组织与癌旁组织中定位表达未见明显统计学差异(p=0.554); p-4EBP.1和p-S6K1在癌组织和癌旁组织中的定位表达有显著统计学差异(p分别为0.001和0.000)。Western-blot结果提示p-mTOR、p-4EBP1和p-S6K1在癌组织中表达的灰度平均值均高于癌旁组织(P值分别为0.001、0.725和0.473)。p-4EBP1在维、汉民族之间的表达有统计学差异(p=0.020,r=0.138), p-S6K1的表达存在组织学分级之间的差异(p=0.029,r=0.044), p-mTOR和p-S6K1与ki-67的表达存在统计学差异(p值分别为0.028和0.011,r值分别为-0.130和-0.151)。三指标与各临床指标的单因素分析显示均与无病生存率无明显统计学差异,多因素分析显示不同民族(p=0.000)、BMI指数(p=0.048)、ki-67的表达(p=0.004)以及p-S6K1的表达(p=0.

1123例食管癌组织中，p16蛋白表达阳性59例，表达阴性64例，阳性率47.97%。 1.2123例食管癌组织中，p38蛋白表达阳性64例，表达阴性59例，阳性率52.03%。 2p16蛋白在食管癌组织中的表达及其与临床病理因素的相关性 不同的临床病理因素作用下，食管癌患者的癌组织中p16蛋白的表达显示：癌组织浸润深度：T分期（T_(is)+T_1+T_2）组的p16蛋白阳性表达显著高于（T_3+T_4）组(χ~2=28.829，P
Neuronostatin是一种新发现的肽类激素,与生长抑素具有共同的前体,在多种组织中都有表达,并具有许多生理功能。之前的报道证明,neuronostatin在热甩尾实验中具有镇痛作用。然而,目前尚未见它在慢性炎症痛和对吗啡镇痛作用方面的报道。因此,本实验对这些生理作用进行了探究。研究结果表明,在福尔马林炎症痛觉模型中,侧脑室注射neuronostatin (1,3,6,12nmol/mouse)能够引起第二相舔足时间的增加,而对第一相没有影响。说明侧脑室注射neuronostatin可以引起痛敏效应,并且这种痛敏效应可以被黑皮素受体拮抗剂SHU9119(50pmol/mouse)和阿片受体拮抗剂纳洛铜(5nmol/mouse)所拮抗,而γ-氨基丁酸(GABAA)受体拮抗剂荷苞牡丹碱(1086pmol/mouse)对其产生的痛敏效应没有影响。另外,在小鼠热甩尾实验中,侧脑室注射neuronostatin

(0.3nmol/mouse)可以明显地增强吗啡(2.5,5和10μg/kg)的镇痛效应。拮抗剂的实验表明,由吗啡和neuronostation引起的协同镇痛效应也可被阿片受体拮抗剂纳洛铜所拮抗,并且这种拮抗作用是通过μ和κ阿片受体起作用的,与δ阿片受体无关。本研究表明在急性痛觉模型中,吗啡和neuronostatin共注射时具有级联放大的镇痛效应。以上实验结果表明neuronostatin引起的痛敏效应依赖于黑皮素系统和内源性阿片系统,而neuronostatin和吗啡共注射引起的协同效应也是依赖于阿片受体。总之,neuronostatin作为一个新的神经肽,在急性痛和慢性炎症痛的调节中具有重要作用。
氟西汀（fluoxetine）是一种选择性五羟色胺（serotonin，5-HT）再摄取抑制剂（selective

确认细节 购买NU7441 serotonin reuptake inhibitors，SSRIs），能选择性地抑制突触前膜对5-HT的再摄取，从而增加突触间隙5-HT水平，达到治疗抑郁症的目的。氟西汀因具有顺应性、安全性、有效性等优点，一直是抑郁症治疗的首选药物。新近研究发现，氟西汀还具有神经保护、抗肿瘤、抗炎等药理作用。对全身性炎症（如感染性休克）模型动物的研究发现，氟西汀能有效抑制小胶质细胞活化以及炎症因子分泌；氟西汀还可通过减少炎症相关细胞、抑制白介素-1β（interleukin-1beta，IL-1β）和肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-alpha，TNF-α）的释放而发挥抗炎作用。但是，氟西汀调节中枢和外周炎症反应的分子机制目前尚未阐明。 抑郁症是一种常见的精神类疾病，主要临床表现为情绪低落，兴趣减低，悲观，缺乏主动性，自责自罪，饮食、睡眠差，严重者可出现自杀念头和行为。世界卫生组织预测，到2020年抑郁症将成为继高血压之后第二大临床慢性疾病。目前关于抑郁症发病机制的研究假说包括单胺假说、受体假说、脑源性神经营养因子假说、神经内分泌假说以及免疫炎性假说等。1995年，Maes首次提出了抑郁症免疫反应假说：即抑郁症伴有免疫系统的激活和炎性反应。近年来研究表明炎症因子，尤其是IL-1β在抑郁症的病理过程中发挥非常重要的作用：临床研究发现抑郁症患者脑脊液和外周血中IL-1β、TNF-α等炎症因子的表达水平显症药物能显著降低血清中IL-1β水平；长期温和应激和足电击习得性无助致抑郁的模型动物中脑内和外周IL-1β升高，应激前脑内注射IL-1受体拮抗剂，能阻断动物的抑郁样行为的产生。因此，抑郁症和炎症相关性以及抗抑郁药物抗炎作用的研究成为近年来基础和临床研究的热点。

IL-1β主要产生于外周单核巨噬细胞和中枢小胶质细胞，并依赖NLRP3炎症小体的激活。NLRP3炎症小体（inflammasome）是由NLRP3（也称NALP3或者cryopyrin）、胱冬肽酶（cysteiny aspartate-specific protease，caspase-1）前体和构架蛋白（apoptosis-associated speck-like protein containing CARD，ASC）组装而成的多蛋白复合物，是天然免疫系统的重要组成部分。NLRP3属于胞浆内模式识别受体（pattern 而且 recognition receptors，PRRs），能识别病原相关分子模式（pathogen-associated molecular patterns，PAMPs）或者宿主来源的危险信号分子（damage-associated molecular patterns，DAMPs），招募和激活促炎症蛋白酶胱冬肽酶-1（caspase-1），活化的caspase-1切割pro-IL-1β和pro-IL-18，最终生成成熟的IL-1β和IL-18。近年来研究发现，NLRP3炎症小体活化与多种疾病诸如糖尿病和Alzheimer病的发生发展相关，然而其与抑郁症的发生以及抗抑郁药氟西汀的治疗作用是否相关目前尚未见报道。 因此，本文应用C57BL/6J小鼠制备慢性温和应激（chronic mild stress，CMS）诱导的小鼠抑郁症模型，研究NLRP3炎症小体介导的炎症反应是否参与抑郁症发病过程及其对氟西汀治疗作用的影响；应用RAW264.7巨噬细胞株，研究、阐明抗抑郁症药物氟西汀对NLRP3炎症小体激活的调节作用及其机制，揭示氟西汀抗抑郁作用的新机制，也为抑郁症的治疗提供新思路。 目的：研究氟西汀对NLRP3炎症小体激活的影响及其机制。 方法：1.应用C57BL/6J小鼠，建立CMS小鼠抑郁症模型，给予氟西汀治疗，共分为三组：对照组、CMS抑郁模型组、CMS抑郁模型+氟西汀给药组；通过糖水偏爱实验、悬尾试验以及强迫游泳试验确证CMS抑郁模型是否成功。 2.应用蛋白质免疫印迹法（Western blotting）检测上述三组小鼠海马NLRP3炎症小体各组分（NLRP3、caspase-1、IL-1β）的表达。3.分离并培养上述三组小鼠骨髓源性巨噬细胞（bone marrow-derived macrophages，BMDM），应用Western blotting方法检测NLRP3炎症小体各组分的表达（NLRP3、caspase-1）；应用酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）的方法检测分泌入细胞上清的IL-1β水平。4.