Specific immunotherapies, such as vaccines(whole cell recombinant, peptide, and dendritic cell vaccines), adoptive cell therapy and immunotherapy targeting tumor stem cells, have the role of activating antitumor immune responses. In the future, treatments will likely include personalized medicine, tailored for numerous molecular therapeutic targets of multiple pathogenetic 时间 pathways.
目的探讨环巴胺靶向抑制Shh信号对乳腺癌细胞增殖、凋亡以及Survivin表达的影响。方法采用荧光定量PCR法检测乳腺癌组织及癌旁正常组织中Shh、PTCH1及GLi1的表达,MTT法检测不同浓度环巴胺对人乳腺癌细胞MCF-7增殖抑制的影响,流式细胞术检测环巴胺对MCF-7细胞凋亡的影响,Western blot检测环巴胺处理前后MCF-7细胞GLi1和Survivin的表达。结果 Shh、PTCH1及GLi1在乳腺癌组织中均呈高表达;不同浓度环巴胺均可抑制MCF-7细胞增殖并诱导其凋亡;环巴胺处理后GLi1和Survivin的表达均降低。结论 Shh信号在乳腺癌组织中呈激活状态,靶向抑制Shh信号可抑制乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡,其可能通过抑制Survivin表达发挥作用。
胰腺癌干细胞在胰腺癌的发生发展过程中起着很关键的作用。最近不断有报道证实针对肿瘤干细胞的治疗可以明显减弱肿瘤干细胞的信号传导。因此胰腺癌干细胞靶向治疗药物可以明显改善胰腺癌患者的预后。现对胰腺癌干细胞靶向治疗的进展作一综述。
肿瘤干细胞是肿瘤组织内具有自我更新能力及无限增殖潜能的一群细胞,对外源细胞毒性药物耐受。卵巢癌肿瘤干细胞在卵巢癌发生、化疗耐药和复发过程中起重要作用。传统治疗对减小肿瘤体积有效,但是治疗后残留的卵巢癌干细胞成为卵巢癌复发和难治的根源,针对卵巢癌肿瘤干细胞的靶向治疗可能在抗卵巢癌治疗中具有重要作用,为临床彻底治愈卵巢癌带来希望。
小细胞肺癌的药物治疗仍面临很大的挑战。局限期小细胞肺癌的标准治疗方案为基于铂类药物的化疗方案联合胸部放疗和预防性全脑放疗。对广泛期小细胞肺癌,化疗仍然是主要的治疗方法,必要时还可进行局部放疗。随着新型化疗药物、分子靶向药物和免疫调节剂的不断涌现,小细胞肺癌药物治疗有了更多的实际选择,但治疗结果迄今并未获得实质性的进步,有待今后进一步的深入研究。
Introduction:Few

data have been published comparing early-phase trials for lung cancer between China and the United States(US).This study was to investigate the differences of phase 1 trials for lung cancer between these two countries.Methods:In 2014,a cross-sectional http://www.selleckchem.cn/products/ABT-263.html survey was conducted to compare phase 1 trials for lung cancer between the Guangdong Lung Cancer Institute(GLCI),the University of Wisconsin Carbone Cancer Center(UWCCC),and the University of Texas MD Anderson Cancer Center(MDACC).Results:We found that the GLCI had a lower percentage of phase 1 lung cancer trials than the MDACC in December2014(23.8%[5/21]vs.59.8%[28/47],P

= 0.006) and the UWCCC in September 2014(16.7%[3/18]vs.34.8%[8/23],P = 0.345).Descriptive analyses were performed for early-phase trials conducted by the CancerTherapy Evaluation Program at the National Cancer Institute(CTEP/NCI),the MDACC,and the Chinese Thoracic Oncology Group(CTONG).There were 149 ongoing early-phase 什么 trials in the Department of Investigational Cancer Therapeutics(Phase 1 program) at the MDACC in October 2014.In contrast,no phase 1 trials had been initiated by the CTONG since its establishment in 2007.Conclusions:These data suggest that a significantly higher percentage of phase 1 trials for lung cancer were conducted in the US than in China.Early-phase oncology trials with robust preclinical data had a higher chance of being approved by the Investigational Drug Branch at the CTEP/NCI.Given the importance of early-phase oncology trials in developing innovative cancer medicines,such studies should be highly encouraged and strategically funded in China.

78%、104.08%、108.97%,亦即在formalin注射后5分钟出现了P-p38的表达峰值,随后恢复正常,但又在formalin注射后1天再次出现P-p38的表达增加之后恢复正常。 购买OSI-744 在此基础上,我们又分别观察了外周或鞘内给予第一组代谢型谷氨酸受体的拮抗剂CPCCOEt或MPEP之后P-p38的表达情况。在formalin注射前15分钟分别在外周或鞘内给予CPCCOEt(100 nmol)、MPEP(50 nmol)或者HEPES(100mM,pH7.4)作为对照,之后在formalin注射后5分钟和1天,取出动物腰膨大部位进行Western

blot检测。结果发现,在外周或鞘内给予CPCCOEt或MPEP之后,可以抑制formalin注射后5分钟时的P-p38的表达增加。而对于formalin注射后1天的P-p38增加,只有在外周给予CPCCOEt时表现出抑制作用。 本实验结果提示:1.formalin外周注射可以引起脊髓p38MAPK的活化,表现为磷酸化的p38MAPK表达增多,提示p38MAPK可能是介导formalin痛反应的主要信号通路;2.外周应用第一组代谢型谷氨酸受体拮抗剂可以抑制脊髓p38MAPK的磷酸化;3.脊髓应用第一组代谢型谷氨酸受体拮抗剂可以抑制脊髓p38MAPK的磷酸化;4.以上结果提示提示第一组代谢型谷氨酸受体(包括外周和脊髓)通过活化脊髓p38MAPK信号通路在formalin引起的慢性痛中发挥重要作用。据我们掌握的文献,这是首次报道第一组代谢型谷氨酸受体通过脊髓(可能是小胶质细胞)p38MAPK在细胞水平介导其功能反应。 结论:1.formalin外周注射可以引起长时程痛敏(持续时间在10天以上),同时伴有脊髓小胶质细胞的活化;2.外周第一组代谢型谷氨酸受体的激活参与了长时程痛敏的发生和脊髓小胶质细胞的活化;3.脊髓第一组代谢型谷氨酸受体的激活参与了formalin诱导的长时程痛敏的发生和脊髓小胶质细胞的活化;4、外周和脊髓的第一组代谢型谷氨酸受体通过脊髓(可能是小胶质细胞)的p38MAPK通路介导上述作用;5、结合我们以往观察到的第一组代谢型谷氨酸受体在formalin急性痛反应中的作用结果提示,第一组代谢型谷氨酸受体(包括外周和脊髓)在痛信号产生和传递及由此引起的痛反应(包括急性痛反应和慢性持续性痛反应)中发挥重要作用。
β_2肾上腺素受体(β_2-AR)激动剂用于哮喘的对症治疗已有60多年的历史。SPFF[2-(4-amino-3-chloro-5-trifluomethyl-phenyl)-2-tert-butylamino-ethanol SRT1720供应商 hydro-chloride]是沈阳药科大学制药工程学院合成开发的新型β_2肾上腺素受体激动剂,前期研究工作已证实它具有强大的支气管扩张作用和相对较高的β_2-AR选择性,同时还具有作用时间较长等特点,目前已处于Ⅱ期临床试验阶段。SPFF的结构中含有一个手性碳原子,因而存在一对对映异构体。由于具有不同立体构象的对映异构体在生物活性、毒性、药物代谢动力学等方面常有很大差异,因此,我们比较研究了SPFF的对映异构体((-)-SPFF和(+)-SPFF)的抗哮喘的作用特点,并初步探讨了它们的作用机制。

首先用离体实验考察了(±)-SPFF及其对映异构体对豚鼠气管平滑肌的扩张作用。结果显示,(±)-SPFF及其对映异构体都能够浓度依赖性的松弛静息张力和被气管致痉剂(组胺和乙酰胆碱)收缩的豚鼠气管条,(-)-SPFF的作用强度强于(±)-SPFF和(+)-SPFF。但是,单一对映体和(±)-SPFF松弛离体豚鼠气管平滑肌的最大效应彼此接近,表明三者的内在活性是相似的。同时我们通过对选择性β_2受体阻断剂ICI-118551拮抗(±)-SPFF、(-)-SPFF和(+)-SPFF作用的分析,还证实了SPFF的单一对映体扩张离体气管平滑肌的作用都是通过B_2受体介导的。离体豚鼠肺支气管灌流实验结果显示了(-)-SPFF在扩张整个气道作用中的显著优势,(-)-SPFF与(+)-SPFF的作用强度差别为23.2倍。此外,(+)-SPFF对(-)-SPFF的影响实验结果显示,(+)-SPFF与豚鼠气管条孵育20分钟对(-)-SPFF松弛静息张力气管条的量效曲线几乎没有影响。

Selleck GSK1120212 其次,通过整体动物的不同模型,考察了(±)-SPFF及其对映异构体扩张在体气管平滑肌的作用。结果显示,灌胃给药时,(-)-SPFF(0.0625,0.25 and 1 mg·kg~(-1))对组胺和乙酰胆碱混合喷雾引起豚鼠窒息的保护作用与同剂量(±)-SPFF的作用相似:经十二指肠内给药时,(-)-SPFF对组胺诱导麻醉豚鼠肺溢流量增加的抑制作用分别强于(±)-SPFF和(+)-SPFF1.6倍和6.3倍:在肺机械功能实验中,单一对映体(-)-SPFF和(+)-SPFF与(±)-SPFF对肺顺应性的降低具有同等作用强度的抑制作用,(-)-SPFF抑制肺阻力升高作用强于(+)-SPFF约3.5倍。此外,SPFF、(-)-SPFF和(+)-SPFF(0.01、0.1和1μM)对致敏大鼠肺组织接触过敏原时释放组胺具有相似的抑制作用,在不影响小鼠气道粘液分泌的情况下,(-)-SPFF(0.04、0.10mg.kg~(-1))和(±)-SPFF(0.10、0.25 mg.kg~(-1))明显促进家鸽气道纤毛的转运功能,而(+)-SPFF(0.04、0.10和0.25 mg.kg~(-1))对家鸽气道纤毛的转运没有促进作用。静脉注射和口服(-)-SPFF对小鼠的LD_(50)(95%confidence limits)分别为55.7(51.6～59.8)和468.3(393.0～543.6)mg.kg~(-1),而静脉注射和口服(+)-SPFF对小鼠的LD_(50)分别为36.2(33.4～39.2)和297.5(257.5～343.7)mg.kg~(-1),提示(-)-SPFF的毒性低于(+)-SPFF。 此外,我们从激动剂在细胞外与受体的结合特征及在细胞内产生的效应([Ca~(2+)]_i)两方面初步探讨了(±)-SPFF及其对映异构体的作用机制。分别以豚鼠肺和心房组织作为β_2-AR和β_1-AR的来源,以碘标左旋吲哚洛尔((-)[~(125)Ⅰ]pindolol,IPIN)作为标记性配基的放射配基结合实验结果显示,(-)-SPFF对β_2-AR的亲和力分别高于(±)-SPFF 6倍和(+)-SPFF 164倍,这可能是(-)-SPFF扩张气道作用强度较高的原因之一。(-)-SPFF、(±)-SPFF和(+)-SPFF的选择指数(K_(i(atri))/K_(i(lung))分别为24.72、7.43和2.

FGFR2功能获得性突变使小鼠呈现出类似人类Apert综合征的典型骨骼表型，包括颅骨早闭，圆头畸形，身材矮小，有望成为研究Apert综合征的良好动物模型之一。

CP-690550分子重量 2. Fgfr2+/S252W小鼠软骨内成骨发育迟缓，骨量减少导致长骨纵向生长障碍。 3.组织学观察发现FGFR2持续增强导致干骺端生长板增殖、肥大软骨层缩短，抑制生长板细胞增殖，并且表达成软骨、成骨标志蛋白下降。 4. Fgfr2+/S252W突变小鼠骨髓基质细胞体外培养诱导实验提示，FGFR2功能持续增强抑制细胞增殖以及软骨细胞早、中期分化，但增强软骨细胞终末期成骨分化能力，最终抑制细胞矿化能力。 5.利用RT-PCR发现FGFR2持续增强导致体外培养BMSCs成软骨基因表达下降，成骨表达基因上调。 6.FGFR2功能持续增强使BMSCs信号通路p38，Erk1/2磷酸化增强，对其使用相应阻断剂后发现相应基因表达上调。FGFR2通过p38信号通路可能调控软骨内成骨多个环节，而Erk1/2主要调控软骨细胞终末分化成骨过程。 7.利用体外培养技术再次验证p38，Erk1/2通路阻断剂对FGFR2功能增强所致骨发育迟缓有挽救作用，且使用p38通路阻滞剂后骨增长明显。 结论： 综上所述，本研究结果表明新建立的Fgfr2+/S252W突变小鼠是研究Apert综合征的良好动物模型之一。模型动物提示FGFR2功能持续增强对软骨内成骨也有重要作用，阻碍软骨内成骨过程，致模型动物肢体长度缩短、骨密度减弱。进一步观察发现FGFR2功能增强引起长骨骺端生长板组织形态异常是导致骨发育异常的关键。体外模拟BMSCs软骨内成骨过程发现，FGFR2功能持续增强抑制BMSCs增殖及成软骨分化能力，但增强成骨细胞相关基因表达，但抑制成骨细胞进一步矿化成骨。对软骨内成骨相关信号通路的研究发现FGFR2下游p38及Erk1/2通路对软骨内成骨影响巨大，且p38对成软骨、成骨过程均有影响，其信号通路阻滞剂对软骨内成骨发育障碍有救治作用。
顺铂(Cisplatin, DDP)是一种疗效显著的抗肿瘤药物,对多种实体瘤均具有较好的临床疗效,因此被广泛应用于癌症的化疗。然而,肿瘤细胞极易对顺铂产生耐药,常导致化疗失败,限制了顺铂的应用。本实验旨在研究新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)对人耐顺铂肺癌细胞(A549/DDP)的体内外溶瘤作用及其信号转导机制。研究发现,NDV能特异而高效地在A549/DDP和A549细胞中增殖,且在A549/DDP细胞中的增殖能力更强,但不能在正常细胞中复制。NDV通过激活caspase依赖的细胞凋亡通路、MAPK通路和Akt通路诱导体外培养的A549/DDP细胞凋亡,且对A549/DDP荷瘤裸鼠具有显著的溶瘤效果。本实验首次研究了NDV对耐药肺癌细胞的溶瘤机制,结果表明溶瘤新城疫病毒在临床治疗顺铂耐药肺癌中具有重要的应用前景。取得的研究结果如下：

{Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|buy Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound Library溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library制造商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library chemical structure|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library数据表|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library nmr|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library clinical trial|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|buy Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound Library溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library制造商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library chemical structure|Antiinfection Compound Library数据表|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library clinical trial|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening| 1.采用TCID50法测定病毒滴度,结果表明NDV(FMW株)能特异而高效地在人耐顺铂肺癌细胞(A549/DDP)中增殖,且较在其亲本肺癌细胞(A549)中的增殖能力更强,但不能在MRC-5人胚肺成纤维细胞中增殖。 2. FACS (Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡,结果表明FMW感染能够诱导A549/DDP细胞凋亡,该凋亡过程对于FMW感染具有时间依赖性。 3. Hoechst33258染色观察细胞核形态,发现对照组细胞核均呈弥散均匀的椭圆状。FMW感染组部分细胞核切割成大小不等的致密浓染碎块,呈现典型的细胞凋亡形态学特征,进一步显示FMW感染引起A549/DDP细胞凋亡。

4. Western Blot检测凋亡相关通路的活化,结果表明FMW感染激活caspase通路,其中caspase-8介导的外源性凋亡通路起主要作用,此外,MAPK通路和Akt通路也被激活。 5.采用pan-caspase抑制剂Z-VAD-FMK(50μM)预处理A549/DDP细胞后再感染FMW, FACS (Annexin V/PI双染法)检测细胞凋亡,发现细胞凋亡被明显抑制,表明FMW诱导的A549/DDP细胞凋亡依赖于caspase的激活。 6.分别用Erk1/2、Jnk、p38和Akt通路特异性抑制剂PD98059(20μM)、SP600125(10μM)、SB203580(10或LY294002(10μM)预处理细胞后再感染FMW, Sorafenib数据表 MTT法分析细胞杀伤率。结果显示,抑制MAPK和Akt通路均能抑制FMW诱导的A549/DDP细胞凋亡,表明MAPK和Akt通路参与该凋亡过程。 7.H&E染色、TUNEL法分析荷瘤裸鼠肿瘤石蜡切片,发现未感染组细胞基本未见凋亡而FMW感染组细胞呈现典型的凋亡特征,表明FMW能诱导A549/DDP或A549荷瘤裸鼠肿瘤细胞凋亡 8.采用QRT-PCR分析FMW M基因表达并以TCID50法测定病毒滴度,研究FMW在荷瘤裸鼠瘤内复制能力。结果表明FMW能在A549/DDP或A549荷瘤裸鼠瘤内特异地高效复制,且在A549/DDP移植瘤中复制能力更强。 9.测量并计算荷瘤裸鼠肿瘤体积,采用SPSS软件进行数据分析,结果显示,FMW显著抑制荷瘤裸鼠肿瘤生长,对A549/DDP及A549移植瘤的抑瘤效果相近,且能够延长荷瘤裸鼠生存期。 本实验首次研究了NDV对耐药肺癌细胞的溶瘤作用,证明NDV通过激活caspase通路、MAPK通路和Akt通路而有效诱导耐顺铂肺癌细胞凋亡,较好地克服了顺铂耐药导致的凋亡下调,对体外培养的A549/DDP细胞和A549/DDP荷瘤裸鼠均具有显著的溶瘤效果。本实验从全新的角度研究了NDV的溶瘤机制,表明NDV有望成为一种治疗顺铂耐药肺癌的理想制剂。
目的观察在高糖环境下不同浓度的全长脂联素(f-APN)对结肠癌细胞株SW480增殖和凋亡的影响；探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路以及半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活化在f-APN诱导结肠癌细胞凋亡过程中的作用。 方法应用不同浓度（0μg/ml、10μg/ml、20μg/ml、30μg/ml）的全长脂联素（f-APN）干预在高糖培养基（葡萄糖含量为4.5g/L的DEME培养基）中培养的结肠癌细胞株SW48024h、48h，分为高糖不加f-APN（APN0组）、高糖+10μg/ml f-APN组（APN10组）、高糖+20μg/ml f-APN组（APN20组）、高糖+30μg/ml f-APN组（APN30组）以及高糖+30μg/ml f-APN+p38MAPK阻滞剂SB203580(10μmol/L)组（APN30+SB组)，同时采用低糖培养基（葡萄糖含量为1.

638%和77.756%(P<0.001)；K562-MKK3(Ala)细胞Gγ-mRNA水平下降,为K562-pcDNA3.1细胞的37.996%(P<0.001)；SB预处理之后,K562-MKK3(Glu)+SB细胞和K562(NaB)+SB细胞HbF表达下降,分别为K562-MKK3(Glu)细胞和K562(NaB)细胞的51.515%和35.142%(P<0.001)；K562-MKK3(Ala)细胞HbF表达下降,为K562-pcDNA3.1细胞的45.144%(P
研究背景

Selleckchem GDC0449 角膜具有透明、无血管、有弹性的特点和较强的屈光能力。正常角膜组织分为上皮层、前弹力层、基质层、后弹力层和内皮层；其中上皮层由多层上皮细胞组成,基质层含有角膜细胞,内皮层由单层排列内皮细胞构成。角膜缘含有丰富的血管网,主要供给角膜周边部的养分；房水、泪液等也是养分的重要来源。 在炎症、外伤、免疫损害、微生物感染等病理因素作用下,角膜缘周边血管网逐渐长入透明角膜内,形成角膜新生血管。角膜新生血管在抵御病理损害中具有重要作用,可以促进炎症吸收、角膜修复并改善角膜血供；同时由于大量的免疫效应细胞聚集在角膜,改变了角膜固有的免疫学特征,导致角膜相对免疫赦免机制的消除；降低角膜的透明性,严重影响视力；为角膜疾病的后续治疗带来重大挑战。 深入研究角膜新生血管生长和调控的机制具有重要的意义。研究发现角膜新生血管的影响因素有很多,炎症反应是角膜新生血管的重要影响因素之一。角膜新生血管与炎症反应相互作用、相互依赖、相互协同。角膜炎性细胞浸润通常出现在新生血管之前,角膜炎性浸润部位与新生血管部位一致。炎症反应引起多种炎性介质、细胞因子释放,从而打破促血管生长因子和抑制血管生长因子之间的平衡,最终导致角膜新生血管。 信号转导研究是生命科学的热点和前沿,其基本研究思路已浸染生命科学的各领域。信号转导将为解释生命基本现象、细胞代谢、肿瘤分子机制、病理反应过程以及开发新型药物提供新的思路。丝裂原活化蛋白激酶是一组能被不同细胞外刺激激活的一系列丝氨酸-苏氨酸激酶,可磷酸化其它细胞质蛋白,并从细胞浆移位至细胞核,作用于多种转录因子,从而激活不同基因表达,产生复杂的生物学功能。在哺乳动物,高度保守的丝裂原活化蛋白激酶是信号从细胞外到细胞核传递的重要信使,参与了胚胎发育、细胞分化、细胞增殖、细胞死亡、对环境的应激适应、炎症反应等多种细胞生理及病理反应。

目前共发现了四种丝裂原活化蛋白激酶亚族,分别是细胞外信号调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶、p38和ERK5。细胞外信号调节蛋白激酶主要作用于细胞分化、转化和增殖；c-Jun氨基末端激酶参与胚胎发育、细胞分化,并且与肿瘤的发生密切相关：ERK5信号通路参与细胞周期、细胞增殖和早期基因表达的调控；而p38信号通路则在炎症反应中具有重要作用。 p38信号通路的激活是细胞内磷酸化级联反应的最后步骤,磷酸化p38是p38的活化形式。p38激活后立即进入细胞核,激活多种蛋白激酶和转录因子,产生复杂的生物学效应。p38在炎症反应过程中的多效性、高效性,使得p38信号转导通路成为炎症相关疾病研究的新的作用靶点而备受关注。p38成为丝裂原活化蛋白激酶家族中调控炎症反应的最重要成员。 炎症反应与角膜新生血管密切相关,而p38信号转导通路在调控炎症反应中具有重要作用,因此p38信号转导通路可能在角膜新生血管调控中具有重要作用。研究也发现p38抑制剂在炎症相关疾病动物模型中表现出较好的抗炎作用,p38信号转导通路抑制剂SB220025能显著降低肉芽肿组织内血管密度。角膜新生血管研究一直是眼科研究的热点和难点。p38信号通路具有复杂的生物学效应,参与炎症反应过程,调控多种细胞因子的表达,从该通路研究角膜新生血管的机制,必将成为研究的新方向和新靶点。 不 实验中,我们通过检测血管化进程中大鼠角膜磷酸化p38表达,来探讨p38信号转导通路和角膜新生血管的相关性；通过研究p38信号转导通路特异性拮抗剂SB203580对大鼠角膜的毒性作用,来研究其用于阻断信号转导通路的可能性；进一步研究SB203580对大鼠角膜新生血管的抑制作用,探讨p38信号转导通路参与调控角膜新生血管的可能机制；最后通过可溶性血管内皮生长因子受体2试图阻断血管内皮生长因子的作用,进一步检测磷酸化p38的表达,并分析p38信号转导通路和血管内皮生长因子的关系。 第一部分磷酸化p38在大鼠角膜血管化进程中的表达 目的 检测p38和磷酸化p38在大鼠角膜血管化进程中的表达,探讨大鼠角膜新生血管生长是否和p38信号转导通路的激活相关,并进一步分析p38和磷酸化p38在大鼠角膜血管化进程中时间和空间分布特征,拟最终证实p38信号转导通路激活可能与大鼠角膜新生血管相关,p38信号转导通路的早期激活可能是大鼠角膜新生血管的始动因素之一,为进一步研究奠定基础。

方法 1.角膜缝线法建立SD大鼠角膜新生血管模型建立大鼠右眼新生血管模型,在大鼠角膜缘内1mm等间距缝合3针,深及基质层。选取未缝线的正常角膜作为阴性对照组,并将缝线后大鼠随机分为缝线后第1日组,第3日组以及第7日组,每组8只。 2.显微镜下观察角膜缝线后每日在手术显微镜下观察,均放大16倍,注意角膜透明度、上皮完整性、缝线数量以及是否存在角膜感染。 3.计算角膜新生血管面积计算角膜缝线后第1日、第3日以及第7日,分别在显微镜下测量角膜新生血管长度,并依据Robert公式计算角膜新生血管面积。 4. Western Blot检测缝线后角膜血管化进程中p38和磷酸化p38的表达缝线当日以及缝线后第1、3、7日,分别从各组随机选取5只大鼠,摘取角膜,收集角膜蛋白,采用Western BMS-907351制造商 Blot方法检测各组角膜p38以及磷酸化p38的表达,并检测目的蛋白IOD与内参GAPDH的IOD,二者比值作为目的蛋白的相对表达量。 5.免疫荧光检测p38和磷酸化p38在角膜上的表达按照分组分别在特定时间摘取角膜,采用免疫荧光的方法检测p38和磷酸化p38在角膜的表达以及定位。 6.统计学分析采用SPSS13.0软件分析,计量资料以均数±标准差表示。当方差齐性时,采用one-way ANOVA分析；方差不齐时采用Welch法校正。组间比较,当方差齐性时,采用LSD分析；当方差不齐性时,采用Dunnett T3进行分析。所有统计推断均采用双侧检验,检验水准α=0.05。 结果 1.显微镜下观察缝线后7d,角膜缘血管网充血,缝线处角膜水肿增厚,并随时间延长逐渐加重,缝线后3d,睫状充血明显,角膜缝线处角膜缘明显局限性充血,可见新生血管缓慢长入,每处约2-5支,缝线处角膜未见明显混浊,全角膜透明；缝线后7d,见大量新生血管长入透明角膜,新生血管呈密集网状,无法计数,部分新生血管长到缝线处,缝线处角膜轻度混浊并增厚。 2.角膜新生血管面积缝线后第1日,未发现新生血管；缝线后3、7d,角膜新生血管面积分别为4.1-1.22、7.26±0.72mm2；而正常角膜无新生血管。 3.Western Blot结果 各组角膜p38的相对表达量为：正常角膜组0.5681±0.1074,缝线后第1日组为0.

99μmol·L-1(95%CI 3.55~13.79μmol·L-1),7.25μmol·L-1(95%CI

4.77~1.02μmol·L-1)。两药联合应用对肺癌细胞的抑制作用增强(P<0.05),同时给药组抑制效果更显著(P<0.05),阻滞细胞于G1期。结论:蛋白激酶C抑制药enzastaurin与EGFR抑制药吉非替尼联用具有较好的协同作用,两药联合应用可能是出现吉非替尼耐药的非小细胞肺癌后续治疗的一个新选择。
肺癌是最常见的恶性肿瘤之一,其发病率和死亡率呈逐年上升趋势,在全世界癌症死亡中占第一位[1]。按照临床和组织病理学特征,肺癌分为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancers,NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancers,SCLC);其中,NSCLC约占80%,SCLC约占20%[2]。目前,NSCLC的治疗仍以化疗为主,常用的化疗药物为含
腺癌已成为最常见的肺癌类型,肺腺癌无论在临床、影像、分子生物学及病理学方面都存在明显的异质性,过去的肺腺癌分类已无法适应目前的发展,迫切需要一种新的分类标准。2011年国际肺癌研究学会(IASLC)、美国胸科学会(ATS)、欧洲呼吸学会(ERS)联合多学科,结合近年肺腺癌各方面的最新进展,对肺腺癌做出了新的分类。新分类取消了细支气管肺泡癌(BAC)这一分类,新增了4个命名:原位腺癌(AIS)、微浸润腺癌(MIA)、鳞屑样生长为主的浸润性腺癌和浸润性黏液型腺癌。肺腺癌新分类凸现出组织学亚型与分子和临床特征的一些新的相关性,为临床诊疗及科学研究提出了新模式、新方向和新目标。
临床研究中的富集设计可以提高效率,节省临床试验的研发时间和资金投入,也会给受试者带来更多的益处。本文从药物研发和评价的角度,对目前国际倡导的临床试验富集设计进行阐述。同时对在中国现有的法规环境下,新药研发中应如何合理地运用富集设计进行了探讨,以期为相关研发人员提供参考。
目的观察国内儿童散发性神经母细胞瘤(neuroblastoma,NB)中间变性淋巴瘤激酶(anaplastic Fasudil lymphoma kinase,ALK)的表达,探讨其在NB发生、发展中的作用。方法应用荧光原位杂交法(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测56例ALK蛋白异常表达的NB中ALK基因的表达。结果 FISH检测显示56例NB中ALK基因46例为正常,10例为异常,其中9例为ALK增多(16%),1例为扩增(1.8%)。结论 ALK基因是NB一个主要的易感基因,国内儿童ALK基因异常的发生率与国外文献报道相近,其有可能成为治疗NB的主要靶点之一。
基因组的改变会导致癌症的发生,这一切是通过癌症基因活化与继后细胞程序或信号转导通路的功能性改变所形成的。随着科技的不断发展,我们不仅仅能够对单一癌症基因序列的改变进行研究,还能够对一系列癌症基因或整个人类癌症基因组序列的改变进行探索。新型基因组改变的发现,提升了我们对癌病变的认知与了解,同时这一发现对人类癌症的诊断、分类与治疗有着一定的变革性作用。这篇综述对人类基因组的结构、人类基因组的检验方法、人类癌症基因组的变化、以及人类癌症基因组学的临床应用做了相应的介绍。
本文介绍了化疗及靶向治疗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的不同疗效,靶向治疗的选择及化疗的选择。提出了多靶点联合、靶向与化疗联合及维持治疗等近年的热点问题,指出了病人可选择的不同的治疗方案。
肺癌在癌症相关死亡中是居于首位的恶性肿瘤。鳞癌是仅次于腺癌的非小细胞肺癌(non-small

查找更多 cell lung cancer,NSCLC)最常见的组织学类型。一些负责恶性肿瘤的发生和维持相关分子改变被称为驱动基因。近来研究证实肺鳞癌也具有与致癌作用及靶向药物疗效有关的独特分子特征。目前发现约40%肺鳞癌已经找到驱动基因,其中纤维母细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,FGFR1)起重要作用。本文将对肺鳞癌驱动基因进行综述。
肺癌是目前恶性肿瘤死亡的首要原因,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌病例的80%。近年来,对癌基因机制认识上的重大进展促进了以阻断异常信号通路和代谢过程为特征的分子靶向治疗的迅速发展,如以表皮生长因子受体(EGFR)和间变性淋巴瘤激酶(ALK)抑制剂为代表的分子靶向药物揭开了NSCLC治疗的新篇章。但由于患者耐药性的产生,寻找新的治疗靶点成为抗肿瘤药物研究的焦点。近期研究显示,众多癌基因的突变、扩增和重排与NSCLC的发生和预后相关。本文重点介绍NSCLC中多种癌基因改变,如HER2突变、BRAF突变、PIK3CA突变、FGFR1扩增、DDR2突变和ROS1重排,以及针对这些靶点抑制剂的研究进展,以期为NSCLC研究和治疗提供新的思路。
随着人类寿命的延长,恶性肿瘤已经成为人类痛苦和死亡的重要原因。预计在2020年,全球新发病例将达1500万(我国占1/5),死亡1000万(我国占1/4),现患病例3000万[1]。迅速增长的癌症病例已经成为世界各国健康医疗系统不堪承受之重。近10年来,伴随着药学和生命科学研究的飞速进展,恶性肿瘤细胞内的信号转导、细胞凋亡的诱导、血管生成以及细胞与胞外基质的相互作用等各种基本过程正渐被阐明。以一些与肿瘤细胞分化增殖相关的细胞信号转导通路的关键酶(蛋白酪氨酸激酶、芳香化酶、拓朴异构酶Ⅰ等)
目的探讨肺癌化疗患者发生医院感染的病原学特点并对其耐药性进行分析,为临床诊断提供依据。方法对2010年7月-2013年7月肿瘤内科采取化疗治疗合并医院感染的肺癌患者140例临床资料进行回顾性分析,并对患者进行病原菌检测以及药敏试验采用纸片法扩散法进行统计,分析患者发生感染部位分布、感染病原菌种类及其构成比、不同病原菌对常用抗菌药物耐药性;采用SPSS18.0软件进行数据统计分析。结果医院共收治肺癌化疗患者2 Gefitinib 071例,其中195例患者发生医院感染,感染率为9.

9%,2/41)；其中1143号患者除Q787Q突变外同时还存在位于KRAS基因2号外显子的12号密码子上的热点突变G12D (2.5%,1/41); BRAF基因和MET基因在所检测的癌组织中均未检测到突变。 (2) EGFR基因突变与肿瘤各临床病理特征及生物学行为分析显示：2例20号外显子突变中1143号为Ⅱ期中分化的肠型管状腺癌,未检测到淋巴结转移,1156号为Ⅱ期弥漫性粘液腺癌,未检测到淋巴结转移。

结论：EGFR、MET、KRAS和BRAF基因的热点突变区在我国胃癌患者中的突变发生率很低,在胃癌的发生发展过程中发挥的作用可能极为有限；胃癌的分子靶向治疗需要寻找有效的新靶点。
目的 Venetoclax浓度 研究c-MET基因异常导致的间质表皮转化因子(Mesenchymal-epithelialtransition factor，MET)高表达在肺源性腺癌组织中出现的临床、病理特征；所翻译蛋白高度持续性磷酸化的样本中c-MET基因拷贝数(Gene copy number，GCN)有何异常；c-MET与表皮生长因子受体(Epidermal growth factor receptor，EGFR)编码基因突变相关性的分析；不同来源的肺源性腺癌组织c-MET表达及EGFR突变情况是否存在差异。 方法 收集100例未接受化疗及分子靶向药物治疗患者的肺源性腺癌组织进行以下实验： 1.采用免疫组化超敏二步法检测100例MET蛋白的表达情况及受体胞内段Tyr1234、Tyr1235两个位点的磷酸化水平； 2.从原100例中选取75例制成组织阵列，用连续切片制成组织芯片。应用荧光原位杂交(Fluorescent in situ hybridization，FISH)技术在组织芯片进行c-METGCN检测实验； 3.采用实时荧光定量PCR法检测100例样本中EGFR的29种突变。 结果 1．c-MET的表达与活化情况：(1)肺源性腺癌组织中c-MET阳性表达构成比43.0%(43/100)；其阳性率与吸烟情况有关(P＜0.05)，样本内吸烟患者MET阳性构成比(28.2%)低于不吸烟样本(52.5%)，MET阳性与年龄、性别、肿瘤分期、组织来源无相关性(P＞0.05)。(2) MET磷酸化阳性的构成比2.0%(2/100)；未发现与各项统计指标间存在规律。(3) MET蛋白阳性样本中有2例为磷酸化阳性(2/43)，染色为强阳性。 2.c-MET基因拷贝数检测结果(共检75例，4例检测失败，明确诊断71例)：(1) c-MET GCN异常构成比14.1%(10/71)，与M分期显著相关(P＜0.05)，M1期检出率大于M0期；余各项指标未见明显相关(P＞0.05)。(2)

c-MET高度多染色体性构成比11.3%(8/71)，其特征同c-MET GCN异常相似。(3) c-MET基因扩增2例，构成比2.8%(2/71)，且为磷酸化阳性病例；未发现与各项统计指标间存在规律。 3.EGFR突变检测结果：肺源性腺癌组织中EGFR突变52例，构成比52%，其中包含3例T790M突变。突变率高低与组织来源有关(P＜0.05)，在胸膜组织中的突变构成比(84.6%)明显高于肺(51.1%)及淋巴结组织(21.4%)。 而且 4. EGFR突变检测结果与MET各项检测结果的相关性分析中均未见相关性。 结论 1.c-MET多表达于不吸烟的肺腺癌人群，MET阳性样本中仅4.7%为持续性磷酸化状态，其表达水平与肺腺癌组织来源及年龄、性别、肿瘤分期无关。 2.c-MET基因扩增是导致MET持续性磷酸化的关键原因；c-MET基因拷贝数异常可能导致肺腺癌转移能力增强，是导致表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（Epidermal growth factor receptor-tyrosine kinases inhibitor，EGFR-TKI）获得性耐药的机制之一；此项检查对评估肺腺癌转移能力、预后及MET-TKI药物的应用有重要意义。 3.未发现EGFR突变与c-MET各项检测结果的相关性；EGFR突变在胸膜组织检出率高于肺及淋巴结，提示EGFR可能是导致肺癌侵袭性的因素。
目的：

榄香烯是提取于莪术根茎具有广泛抗癌作用的一种中药制剂，是我国自行研发的一种抗癌药物，对多种肿瘤细胞具有抑制作用并且已经引入到临床的治疗使用中。它的优势在于治疗肿瘤过程中对病人没有骨髓抑制且不易产生耐药性，相反能使病人的免疫系统能力得到部分提高。因此在临床中逐渐被广泛使用。 c-Met是由原癌基因c-Met编码的具有酪氨酸激酶活性的受体， c-Met受体的异常激活会引发肿瘤细胞的增殖，侵袭浸润，血管生成等行为，因此在一些实体肿瘤中高表达，与恶性疾病的发生发展及预后息息相关。相反，若干扰抑制肿瘤细胞c-Met分子的表达，会控制肿瘤的发生发展，使得肿瘤病人的预后得到显著提高。 Selinexor 价格 本文旨通过检测经榄香烯抗癌药物处理后的小鼠肝癌H22细胞及瘤体中c-Met受体的表达水平，明确榄香烯药物发挥的抗癌作用与c-Met受体的表达水平是否具有相关性；进一步探讨揭示榄香烯抑制肿瘤细胞生长的分子学机制。 方法： 1.H22细胞表面c-Met受体表达的鉴定：采用RT-PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术检测c-Met受体在H22细胞株表面的表达水平。 2.体外试验：H22细胞经榄香烯抗癌药物作用不同时间后，采用RT-PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术检测榄香烯作用不同时间段细胞中c-Met受体的表达水平。 3.体内试验：建立肝癌H22细胞荷瘤小鼠模型，利用不同浓度榄香烯注射荷瘤小鼠给予治疗，采用RT-PCR，免疫组化技术检测治疗后瘤体中c-Met受体的表达水平。 结果： 1.经RT-PCR，免疫荧光以及免疫印迹技术鉴定，证明H22细胞表面有c-Met受体的表达，且定位于细胞的胞膜及核膜上。 2.体外试验：经RT-PCR，免疫荧光和免疫印迹技术检测结果证明随着榄香烯抗癌药物作用时间的增加c-Met受体的表达水平逐渐下降。 3.

1μM以下。 3)以新引入的结构交叉改变Block B和Block D单元，得到的目标产物以97的活性最好，c-Met IC50为8.6nM，并且97对Met介导的细胞增殖具有明显的抑制作用(90.5%/1μM)。 4)继续以97为改造基础设计了α-烷基取代的哌啶酮类化合物。同时通过骨架迁越设计合成了异黄酮类化合物。该类化合物的生物活性评价正在进行中。

通过上述的活性评价对该类化合物进行了初步的构效关系评价：对Block A苯环的取代对活性的影响较弱；Block B片段以吡啶酮和α-氯代哌啶酮结构最优，环状连接臂结构均优于柔性直链结构片段；Block B与Block C之间连接的酰胺氢是活性必需的；Block D片段以喹啉基取代最优，要强于3-氯-2-氨基吡啶取代。 2、Combretastatin A-4类似物的设计、合成与生物活性研究 本部分在设计合成了CombretastatinA-4(CA-4)的11个类似物，分别以N-甲基化的酰胺键、马来酰胺环和2H-1,4-二硫嗪为连接臂。对所合成的CA-4类似物选用胰腺癌细胞株(BxPC3)、乳腺癌细胞株(MCF-7)、肺癌细胞株(A549)和结肠癌细胞株(HCT116)进行了细胞毒活性评价，发现活性较CA-4的活性下降明显，只有化合物226的细胞毒性保持在纳摩尔级别，但是相比CA-4活性降低了50倍以上。
1目的 肺癌是最常见的肺原发性恶性肿瘤,近年来肺癌的发病率和病死率均迅速上升,其中男性患者中肺癌的死亡率已居首位。其中非小细胞肺癌的发病率在所有肺癌中比例最高。肺癌的发生及发展与肿瘤相关基因的异常表达存在着密切的关系。哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian Depsipeptide体内 GDC 0449 target of rapamycin,mTOR)作为一种高度保守的蛋白激酶,可以通过整合生长因子和营养信号来调节肿瘤细胞生长,是肿瘤生物调节中的关键性基因。目前mTOR已成为肿瘤治疗的生物靶点。

慢病毒介导的RNA干扰是目前公认的最有效的基因沉默手段之一。本文拟通过利用慢病毒介导的RNA干扰技术,以非小细胞肺癌细胞A549为研究对象,以mTOR为目的靶基因。利用MTT、流式细胞术、克隆形成、Transwell及裸鼠体内试验等技术,分别在体外及体内环境中探讨降低mTOR的表达对A549细胞生物学行为的影响。此外通过检测P70S6K, MT1-MMP, HIF-1a, VEGFA, cyclinD1等基因的表达变化,进一步分析mTOR调控肿瘤生物学功能的分子机制。本研究旨在通过以上实验探讨mTOR在肺癌细胞中的作用及其机理,同时为mTOR作为治疗性靶基因在临床方面的应用、为肺癌的基因治疗、基因药物的研制提供必要的实验依据。

2方法 2.1根据mTOR编码区基因序列,设计合成4条shRNA,并克隆到慢病毒表达载体。转染A549细胞后,应用RT-PCR及western blot检测其干扰效果,并确定干扰效率最好的一条shRNA。最后分别将其包装成带有GFP标签及Puro抗性基因的慢病毒颗粒。 2.2体外实验中,将带有GFP绿色荧光标签的慢病毒感染A549细胞。应用MTT、细胞生长曲线、克隆形成、流式细胞术检测A549细胞的增殖和凋亡能力；应用transwell检测细胞侵袭能力；利用western Dorsomorphin分子重量 blot检测mTOR的表达降低对P70S6K,MT1-MMP, HIF-1a, VEGFA, cyclinD1蛋白表达的影响。 2.3体内实验中,利用带有Puro抗性基因的慢病毒感染A549细胞并获得持续表达mTOR shRNA及对照病毒的稳定细胞株。将获得的稳定细胞株扩增并以107/只的细胞浓度接种裸鼠。接种后对裸鼠的体重及肿瘤形成进行监测,分析mTOR的低表达对A549细胞成瘤性的影响。 2.4统计学处理：应用SPSS16.0统计分析软件进行统计学处理,计量资料采用均数士标准差(X±s)表示,多样本均数比较采用方差分析,两两比较采用LSD比较,率的比较采用X2检验等进行统计学处理,显著性检验水准取a=0.05。 3结果3.1成功将四条mTOR shRNA克隆至pSIHl-H1-copGFP慢病毒克隆载体,分别为Sh-mTOR-6506, Sh-mTOR-3266, Sh-mTOR-4995, Sh-mTOR-6216。分别转染A549细胞后,通过RT-PCR及western blot验证mTOR的表达水平后发现,Sh-mTOR-6216对A549细胞中mTOR的抑制率可达70%以上,干扰效率明显高于其他干扰组及对照载体组。然后成功包装含有该shRNA序列的带有GFP荧光标记的慢病毒lenti-GFP-mTOR及Puro抗性基因的慢病毒lenti-Puro-mTOR,分别用于以下的体外实验及体内试验。 3.2体外实验中,利用lenti-GFP-mTOR慢病毒感染A549细胞。感染后48h,MTT检测结果显示：空细胞组,对照慢病毒组及lenti-GFP-mTOR组在570nm的吸光度值分别为：0.687±0.103,0.667±0.037,0.356±0.

636、0.702和0.581,立体场和静电场的贡献分别为0.7和0.3,并用测试集进行了验证。测试集非交叉验证相关系数(r2pred)为0.808。该模型具有显著的统计学意义,为进一步开发新的双吗啉类PI3Kα抑制剂奠定了基础。
真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)在蛋白翻译起始过程中发挥重要作用,与肿瘤细胞的生长、增殖和分化等密切相关。随着对eIF4E功能及相关信号通路研究的不断深入,以eIF4E及相关信号通路为靶点的药物在肿瘤治疗中的作用日益引起重视。目前已有部分相关抗肿瘤药物上市或进入临床试验。本文综述了作用于eIF4E及相关通路的小分子抑制剂的研究进展。
癌症发生是一个多阶段的过程,涉及到调控着各种细胞功能的数以百计的基因和基因产物。当今的主流观点认为,可以利用靶向特定或多个癌基因、信号蛋白或转录因子的小分子抑制剂来预防癌症发生。多种食物成分被认为有望成为这样的抑制剂,其中很多似乎都作用于多种肿瘤相关的细胞信号通路,具有强抗癌活性、低毒性和有限的毒副作用。因此,联合用药或者多靶点药物的策略日益被认可。强有力的现代技术对于加速发现药物尤其是可抑制多条细胞信号通路的化合物是必需的。例如,结合超级计算机技术如虚拟筛选、蛋白结构测定和实验室验证分析来鉴定特定抗癌化合物的多种蛋白靶标。本文重点讨论了PI3-K/PTEN/Akt/mTOR和Ras-Raf-MEK-MAPK这两条在癌症发生中有重要作用的信号通路,描述了计算机技术在鉴定这些通路的小分子抑制剂中的应用。最后,本文介绍了几个运用上述组合策略所鉴定验证的可用于化学预防的小分子及其蛋白质靶标。
研究苯并咪唑类化合物对PI3Kδ抑制作用的三维定量构效关系。采用CoMFA(比较分子场)方法进行研究,建立CoMFA模型。结果:交叉验证系数q2=0.702,相关系数r2=0.981,F=104.661,标准偏差SD=0.211。结论:苯并咪唑类PI3Kδ抑制剂CoMFA模型具有较好的预测能力,本实验研究的三维定量构效关系,对开发和研制此类抑制剂能够起到重要的指导作用。
磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)是细胞内重要的信号转导分子,在细胞存活、增殖和分化过程中起重要调节作用。PI3K是PI3K/AKT/mT0R信号转导通路中的关键节点蛋白,调控着重要的生命活动。现已证实磷脂酰肌醇3-激酶(PI3Ks)是潜力巨大的药物治疗靶点,特别是PI3Kα现己成为抗肿瘤治疗的重要靶点之一。目前己有多种针对PI3Ks的抑制剂进入临床研究。然而现有抑制剂的化学类型不多且选择性不高、临床应用受局限。因此积极研究和开发结构新颖的PI3K选择性抑制剂对于疾病的靶向治疗具有重要意义。本文将对选择性PI3K抑制剂在抗肿瘤方面的研究进展作一综述。
生物活性化合物作用靶点的确认是化学生物学和药物开发中的关键问题之一。随着科技的进步与发展,许多靶点鉴别的方法和技术已经被报道。目前的靶点鉴别方法主要有两大类:亲和色谱为基础的直接法,通过检测药物与其靶点的结合来鉴别靶点;非亲和为基础的间接法,通过生理学反应或生物化学标记而推断药物的靶点或作用途径。本文主要围绕这两类靶点鉴别方法进行综述。
PI3K-Akt信号通路作为细胞内重要信号转导通路之一,通过影响下游多种效应分子的活化状态,在体内发挥着促进细胞增殖和抑制凋亡的关键作用,它与人类多种肿瘤的发生和发展密切相关。本文就PI3K-Akt信号通路的功能、调节与肿瘤的相关性及其在肿瘤治疗中的应用等方面进行文献综述,以期能为以PI3K-Akt信号通路中某些关键分子为靶点的肿瘤治疗及靶向药物研究提供参考。
PI3K-AKT信号通路是重要的细胞内信号转导通路,与类风湿性关节炎(RA)的发生发展密切相关。该信号通路的活化状态受到严密调控:包括负调控因子PTEN、SHIP和正调控因子TNF-α、TGF-β、TRAIL等。RA患者滑膜细胞中此信号通路处于异常激活状态,导致下游抗凋亡基因高表达并且影响下游多种效应分子,在RA患者关节滑膜细胞增殖和凋亡失衡中发挥关键作用。过度增生的滑膜细胞向关节软骨和骨组织浸润生长,导致患者关节畸形和功能障碍。因此,使用PI3K-AKT信号通路抑制剂或上调该信号通路中的内源性负性调节蛋白的表达可逆转RA滑膜细胞的过度增殖,为治疗此疾病提供新靶点。
应用分子靶向药物治疗晚期肺腺癌已逐渐成为当今临床研究的主流,其中EGFR基因突变患者可从靶向治疗中获益。肺鳞癌驱动基因的研究相对较少,近期多种检测技术对肺鳞癌标本进行基因检测,结果发现多数标本存在多个可测靶点,针对这些靶点已开发出一系列药物,其疗效仍待观察。
目的检测瘢痕癌中PI3K/AKT信号通路中PI3K,AKT及其下游靶基因Bcl-2的表达,分析该通路靶向治疗靶点及靶向治疗的可行性。方法研究对象为瘢痕癌组织,以正常皮肤表皮为对照。免疫组织化学(SP法)技术检测PI3K,AKT,Bcl-2蛋白的表达;原位杂交技术检测PI3K

很少 购买Everolimus 此网站 mRNA,AKT mRNA的表达。结合图像分析,分别计算被检组织中所检各项指标的平均光密度和阳性面积,所有数据运用SPSS16.0软件进行统计学分析。结果 PI3K蛋白及其mRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达,在瘢痕癌组织中呈阳性表达。瘢痕癌组表达水平、表达强度与正常皮肤组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。AKT蛋白及其mRNA在正常皮肤表皮呈阴性表达,在瘢痕癌组织呈强阳性表达。瘢痕癌组表达水平、表达强度与正常皮肤组比较,差异有统计学意义(P0.

大鼠脾脏组织经过研磨等处理后,得到大量的脾细胞混悬液,可以满足进一步的分离培养的需要;2.观察贴壁细胞, 1-3h细胞少量贴壁,12h左右的贴壁细胞增多, 24h的贴壁细胞减少。12h是贴壁细胞合适时间; 3.相差显微镜下观察到贴壁培养的脾脏巨噬细胞多为圆形或椭圆形,少数呈梭形或多边形。镜下观察细胞体积较大,细胞膜完整,细胞核清晰可见,胞浆内容物丰富;免疫组织化学结果显示贴壁的脾脏巨噬细胞CD68表达阳性,提示所得的细胞是脾脏巨噬细胞,台盼蓝染色显示细胞活力>95%,瑞氏染色鉴定细胞纯度>90%。

Romidepsin 结论:1分离培养出活力和纯度符合实验要求的大鼠脾脏巨噬细胞;2.贴壁12h是大鼠原代脾脏巨噬细胞的合适贴壁培养时间。 第二部分轻度热应激对大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的影响 目的:探讨轻度热应激对大鼠脾脏巨噬细胞免疫功能的影响。 方法:以始终处于37℃的大鼠原代脾脏巨噬细胞作为对照组,实验组将大鼠原代脾脏巨噬细胞置于41℃恒温箱中,使细胞轻度热应激1h,然后恢复到37℃,分成应激后0min,30min,60min,120min,180min五个亚组组,总共六个组;以吞噬中性红能力(OD540nm值)检测巨噬细胞的吞噬功能、噻唑蓝法测定巨噬细胞对L1210细胞的杀伤作用来反应巨噬细胞的杀伤活性,Transwell小室趋化装置观察巨噬细胞趋化活性变化;采用双抗夹心ABC-ELISA法检测大鼠脾脏巨噬细胞分泌的TNF-a,IL-12浓度的变化。 结果:轻度热应激(41℃、1h)后,实验组大鼠脾脏巨噬细胞的功能均发生了变化,而且与应激后恢复时间有关。热应激后0min,巨噬细胞的OD540nm值由正常的0.21±0.01上升到0.34±0.01(p<0.05),然后继续上升,至60min达最高值0.81±0.04(p<0.01),随后逐渐下降,应激后180min仍然有0.47±0.03(与对照组比较,p<0.05);杀伤活性由正常的35.30±4.37﹪上升到应激后0min的45.00±4.74﹪(p<0.05),在60min分钟达到最大值82.07±5.17﹪(p0.05);趋化作用也呈现大致相同的变化趋势,大鼠脾脏巨噬细胞正常趋化活性为23.40±5.32/HP;热应激1h后0min为34.60±5.22/HP(p< 0.01)。 结论:轻度热应激后,大鼠脾脏巨噬细胞的吞噬功能、杀伤活性、趋化活性都有上调;在实验时间内,大鼠脾脏巨噬细胞分泌的细胞因子TNF-α和IL-12在轻度热应激后随着时间的延长而增加。提示轻度热应激对大鼠脾脏巨噬细胞的免疫功能有促进作用。 第三部分Bip蛋白在轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞中的表达与意义 目的:探讨轻度热应激大鼠脾脏巨噬细胞Bip蛋白的表达及其对细胞功能改变的影响。 方法:原代培养大鼠脾脏巨噬细胞,将细胞置于41℃恒温箱中,使细胞轻度热应激,1h后恢复到37℃,分别检测应激后0min,30min,60min,120min,180min巨噬细胞BipmRNA、Bip蛋白的表达;同时段分别检测巨噬细胞吞噬功能、杀伤活性和趋化作用。

点击此处 结果:(1)轻度热应激后,大鼠脾脏巨噬细胞BipmRNA的表达明显增加,30min后到达高峰,60min、120min时仍高于对照组(p<0.01),180min后恢复至正常水平。Bip蛋白的表达在轻度热应激60min后到达高峰,120min、180min时仍高于对照组(p<0.01)。P38MAPK抑制剂预处理大鼠脾脏巨噬细胞,与应激组比较,热应激后巨噬细胞吞噬、趋化和杀伤活性明显降低(P0.05)。应激组P38MAPK蛋白表达明显上调,与对照组和抑制组比较差异有显著性(P<0.01);P38MAPK抑制剂预处理后,抑制组P38MAPK蛋白表达受到抑制,与应激组比较(P
目的:研究在缺血性脑水肿病理过程中,水通道蛋白家族(aquaporins, AQPs)表达变化的时空规律及其与脑水肿形成的关系,初步探讨AQPs在缺血性脑水肿过程中的作用及其表达调控机制。 方法:成年健康雄性Wistar大鼠392只,随机分为假手术对照组和缺血组,用大脑中动脉栓塞法制作脑缺血动物模型,假手术对照组除不插线栓外,其余操作与缺血组相同。每组在造模成功后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h取出大鼠脑组织,分别采用HE染色、透射电镜对相应部位进行病理观察,干湿重法计算脑组织含水量变化,免疫组化(Immunohistochemistry,IHC)、免疫荧光(Immunofluorence)观察各组相应时间点脑组织AQPs的表达变化,免疫印迹、Real-time

PCR、测定各组相应时间点水肿脑组织AQPs含量的变化。同时运用免疫印迹检测水肿脑组织ERK(Extracellular signal regulated LY294002核磁共振 kinase,ERK)含量的变化。 结果:在假手术对照组,脑组织形态、脑含水量、AQPs及其mRNA的分布及表达、ERK1/2总量以及磷酸化ERK1/2( phosphorylated ERK1/2, pERK1/2)量在各时间点均无明显变化。脑缺血后,光镜和电镜观察可见脑组织出现缺血性改变:细胞及血管周围间隙明显扩大,部分细胞坏死,胞核浓染或崩解,胶质细胞增生。缺血1小时后,脑含水量明显升高,并随缺血时间的延长而逐渐增加,在缺血后24小时达到峰值。免疫组化和免疫荧光结果显示,AQPs在海马、脉络丛、脑膜、视上核、室旁核、丘脑,大脑皮质等部位的星形胶质细胞上呈阳性表达;AQP3,AQP5,AQP8和AQP9还分布于丘脑和皮层下神经元。脑水肿组织中AQP4、AQP9及其mRNA的含量随脑缺血时间的延长而增加,在缺血后24小时表达最强。而AQP3, AQP5, AQP8及其mRNA在缺血后迅速增加,至6h到高峰,后缓慢降低,至24h仍高于对照组。脑水肿的形成过程中,AQPs mRNA和蛋白的表达呈高度正相关(P<0.05),AQP4、AQP9的表达与脑含水量的变化亦呈显著正相关(P0.05)。高渗液作用可导致细胞皱缩,细胞活性下降,折光性差,并随培养液高渗程度的上调和高渗液作用时间的延长而加重。在高渗液作用下,星形胶质细胞的AQP4、AQP9及其mRNA表达随高渗程度的增加而增强,AQP4、AQP9及其mRNA表达水平在12小时内持续增加,随后开始下降,至24小时后仍高于对照组(P<0.05);AQP3,AQP5和AQP8及其mRNA表达随高渗程度的增加而增强,于6h达高峰,随后开始下降,至24小时后仍高于对照组(P0.

Recent advances in molecular research on GC have resulted in the introduction of new diagnostic and therapeutic strategies into clinical settings.The antihuman epidermal growth receptor 2(HER2)antibody trastuzumab has led to an era of personalized therapy in GC.In addition,ramucirumab,a monoclonal antibody targeting

vascular endothelial growth factor receptor(VEGFR)-2,is the first biological treatment that showed survival benefits as a single-agent therapy in patients with advanced GC who progressed after firstline chemotherapy.Using NGS to systematically 很少 identify gene alterations in GC is a promising approach with remarkable potential for investigating the pathogenesis of GC and identifying novel therapeutic targets,as well as useful biomarkers.In this review,we will summarize the recent advances in the understanding of the molecular pathogenesis of GC,focusing on the potential use of these genetic and epigenetic alterations as diagnostic biomarkers and novel therapeutic targets.
Raf-MEK-ERK信号转导通路是调控细胞生长、分化和增殖最重要的通路之一。在该通路中,Raf的突变会导致肿瘤的发生,尤其是B-Raf,其在肿瘤中的突变率较高,是目前抗肿瘤药物研究的重要靶标之一。综述多种常见的B-Raf激酶抑制剂及其相关耐药机制的研究进展。
Insulin resistance is a hallmark of type 2 diabetes. In an effort to understand and treat this condition,

re searchers have used genetic manipulation of mice to uncover insulin signaling pathways and determine the effects of their perturbation. After decades of research much has been learned, but the pathophysiology 所以 o insulin resistance in human diabetes remains contro versial, and treating insulin resistance remains a chal lenge. This review will discuss limitations of mouse models lacking select insulin signaling molecule genes 还有 In the most influential mouse models, glucose metabo lism differs from that of humans at the

cellular, organ and whole-organism levels, and these differences limi the relevance and benefit of the mouse models both in terms of mechanistic investigations and therapeutic development. These differences are due partly to im mutable differences in mouse and human biology, and partly to the failure of genetic modifications to produce an accurate model of human diabetes. Several fac tors often limit the mechanistic insights gained from experimental mice to the particular species and strain including: developmental effects, unexpected meta bolic adjustments, genetic background effects, and technical issues. We conclude that the limitations and weaknesses of genetically modified mouse models of insulin resistance underscore the need for redirection of research efforts toward methods that are more directly relevant to human physiology.