“目的:对蛇床子提取物中的香豆素类化合物进行快速分析与鉴定。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC),选择C18反相色


“目的:对蛇床子提取物中的香豆素类化合物进行快速分析与鉴定。方法:采用超高效液相色谱法(UPLC),选择C18反相色谱柱,以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,二元线性梯度洗脱进行分离;联用电喷雾飞行时间质谱(ESI-TOF-MS/MS)获得蛇床子提取物中各香豆素成分的精确分子量和分子式;采用碰撞诱导解离技术获得半抑制浓度各化合物裂解碎片信息,结合文献对蛇床子提取物中的各化合物进行鉴定。结果:蛇床子提取物中各化合物在10 min内达到了基线分离,由MS和MS/MS结果推断其中的5种香豆素类成分分别是花椒毒酚、花椒毒素、佛手苷内酯、欧前胡素和蛇床子素。结论:UPLC/ESI-TOF-MS/MS技术能对蛇床子提取物{Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|Selleck Anti-infection Compound Library|Selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|selleck Anti-infection Compound Library|selleck Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|Anti-infection Compound Library|Antiinfection Compound Library|购买Anti-infection Compound Library|Anti-infection Compound Library半抑制浓度|Anti-infection Compound Library价格|Anti-infection Compound Library花费|Anti-infection Compound LibraryDMSO溶解度|Anti-infection Compound Library购买|Anti-infection Compound Library生产商|Anti-infection Compound Library查找购买|Anti-infection Compound Library订单|Anti-infection Compound Library mouse|Anti-infection Compound Library化学结构|Anti-infection Compound Library分子量|Anti-infection Compound Library molecular weight|Anti-infection Compound Library说明书|Anti-infection Compound Library supplier|Anti-infection Compound Library体外|Anti-infection Compound Library细胞系|Anti-infection Compound Library concentration|Anti-infection Compound Library NMR|Anti-infection Compound Library体内|Anti-infection Compound Library临床试验|Anti-infection Compound Library cell assay|Anti-infection Compound Library screening|Anti-infection Compound Library high throughput|购买Antiinfection Compound Library|Antiinfection Compound Library半抑制浓度|Antiinfection Compound Library价格|Antiinfection Compound Library花费|Antiinfection Compound LibraryDMSO溶解度|Antiinfection Compound Library购买|Antiinfection Compound Library生产商|Antiinfection Compound Library查找购买|Antiinfection Compound Library订单|Antiinfection Compound Library化学结构|Antiinfection Compound Library说明书|Antiinfection Compound Library supplier|Antiinfection Compound Library体外|Antiinfection Compound Library细胞系|Antiinfection Compound Library concentration|Antiinfection Compound Library临床试验|Antiinfection Compound Library cell assay|Antiinfection Compound Library screening|Antiinfection Compound Library high throughput|Anti-infection Compound high throughput screening|中香豆素类化合物进行有效鉴别。”
“目的:研究酪氨酸激酶RON(recepteur d’origine nantais)在胰腺癌组织中的表达及其意义.方法:收集胰腺癌组织及相关癌旁组织31例,正常胰腺组织8例,采用免疫组织化学技术检测组织中RON的表达.结果:RON在正常胰腺组织、癌旁组织、抑制剂胰腺癌组织中均见阳性表达,胰腺癌及癌旁中的表达强度高于正常胰腺组织,胰腺癌RON的表达强度强于癌旁组织(P<0.05).RON表达与患者年龄、肿瘤大小、组织学类型和肿瘤部位等均无关,与胰腺癌临床分期、分化程度及淋巴结转移相关(P<0.05).结论:RON表达量的增多与胰腺癌的发生、发展有关."
“目的研究NF-κB信号通路阻断对肝癌细胞SMMC7721生长增殖的影响。


“[目的]研究血浆心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在早期急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。[方法]选择2008年


“[目的]研究血浆心型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)在早期急性心肌梗死(AMI)诊断中的价值。[方法]选择2008年5月~2008年12月因胸痛就诊于大连医科大学附属第一医院,被确诊为急性心肌梗死的患者为对象,共收集27例,选择正常对照50名,为体检健康者。什么采用免疫胶体金渗透方法定性检测正常对照和急性心梗患者发病3 h内血浆的H-FABP,并与心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶质量(MMB)和肌酸激酶(CK)的检测结果进行比较。[结果]H-FABP在急性心梗病人发病3 h内诊断早期ATrichostatin A化学结构MI的阳性率(96%)明显高于cTnI(68%)、MMB(23%)和CK(24%)(P<0.05)。[结论]H-FABP对于诊断早期AMI具有较高的敏感性和良好的特异性,其对早期急性心肌梗死的诊断敏感性优于cTnI、MMB、CK。"
Fludarabine 价格概述了放射性药物在神经系统、心血管、肿瘤、乏氧组织、基因显像等方面的应用前景,并提出今后可能的发展方向:基于计算机的放射性药物设计;利用组合化学、噬菌体展示技术筛选先导化合物;通过化学修饰提高放射性药物的性能;大力发展PET药物,新的放射性标记技术;开展Tc和Re化学研究;积极开展诊断/治疗用放射性核素的研发等等。

结果53例诊断为AMI,74例为非AMI。血清MYO在AMI发作后快速释放入血,2 h开始上升,4~6 h达高峰,峰值较参考上限升

结果53例诊断为AMI,74例为非AMI。血清MYO在AMI发作后快速释放入血,2 h开始上升,4~6 h达高峰,峰值较参考上限升高5~20倍,CK-MB与之相比,反应明显较慢;发病4 h内,MYO的敏感性、特异性分别为93.5%、67.0%,CK-MB对应值则为51.0%、79.7%。结论MYO在心肌Cobimetinib临床实验细胞受损后具有快速释放的动力学特征,在AMI的早期,血清MYO的诊断敏感性较高,在溶栓治疗过程中,能迅速反应心肌再灌注情况,另外CK-MB的特异性较高;因此联合检测两项指标对AMI的早期诊断和排除,监测溶栓治疗效果,具有重要的应用价值。”
“目的探讨检测外周血类风湿因子(IgAC220分子量M-RF、IgA-RF、IgG-RF)、白细胞介素-1受体Ⅰ型(IL-1RI)和周期素依赖性蛋白激酶2(CDK2)水平对类风湿关节炎(RA)的实验诊断价值。方法对象包括RA患者94例,其中活动期和非活动期各47例;系统性红斑狼疮(SLE)患者40例,其中活动期和非活动期各20例GSK1120212小鼠;急性上呼吸道感染(AURTI)患者20例;健康体检者20名(对照组)。检测所有对象外周血血清IgM-RF、IgA-RF、IgG-RF、IL-1RI(ELISA定量检测)、CDK2(时间分辨荧光免疫分析)水平。对结果进行统计分析,绘制ROC曲线,计算曲线下面积(AUC)。结果RA活动期患者组与缓解期患者组比较CDK2、IgA-RF有统计学意义(P<0.05)。

结果150株铜绿假单胞菌中,有56 0%的菌株外排泵表型试验阳性,以四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、头孢噻肟、亚胺培南和美罗培

结果150株铜绿假单胞菌中,有56.0%的菌株外排泵表型试验阳性,以四环素、氯霉素、环丙沙星、庆大霉素、头孢噻肟、亚胺培南和美罗培南作为底物,分别有17、6、12、29、35、18、31株菌在5mg/LCCCP的条件下MIC值降低≥4倍,其中有56.0%的菌株同时对>2种的药物有明显的外排作用;主动外排机制不仅存在耐药菌株,而且也存在于敏感菌株,PD98059 molecular weight但CCCP对耐药菌株的影响更大;oprM、mexB和mexR外排泵基因普遍存在于铜绿假单胞菌中。结论主动外排作用是铜绿假单胞菌多药耐药的重要原因之一,主动外排泵抑制剂在体外能降低多种抗菌药物对铜绿假单胞菌的MIC,外排泵抑制剂在克服细菌的耐药性方面有一定的应用前景。”
“非甾体抗炎药(NSAIDs)是一类不含有甾体结构一般,具有镇痛、抗感染、解热等功能的药物,广泛用于骨关节炎、类风湿性关节炎、多种发热和各种疼痛症状的缓解。据统计,全球大约有5亿人在使用NSAIDs;在我国,NSAIDs的临床应用也十分普遍。同时,NSAIDs不良反应的发生率比较高,本文旨在探讨研究非甾体抗炎药物的重要意义。”
“目的:探讨维生素D3在结肠癌中的抗肿瘤机制www.selleckchem.cn/products/ldn193189.html及其与抑癌基因runt相关转录因子3(RUNX3)的关系,为临床有效治疗结肠癌提供依据。方法:不同浓度维生素D3作用于SW480结肠癌细胞系,RT-PCR和Western blot分别检测RUNX3在mRNA和蛋白水平的表达情况。构建RUNX3基因的小干扰RNA载体并将其转染SW480结肠癌细胞,经G418筛选获得稳定表达的细胞系。MTT法和流式细胞术检测维生素D3对转染前后的细胞生长作用的影响。

结论复方酸枣仁油栀子油组方合理,具有镇静、催眠作用,复方中酸枣仁油、栀子油起协同作用。”
“环氧化酶-2(COX-2)在

结论复方酸枣仁油栀子油组方合理,具有镇静、催眠作用,复方中酸枣仁油、栀子油起协同作用。”
“环氧化酶-2(COX-2)在体内具有许多重要功能,当其过度表达时,预示体内某些重要功能紊乱。简介其主要功能,重点总结其天然来源抑制剂的种类和作用特点,阐释其研究及开发意义。”
“目的本研究探讨红细胞蛋白激酶C(PKC)活性变化对锚蛋白的影响。方法采用γ-P32标记和免疫沉淀法检测锚蛋白磷酸化情况;采用间接免疫荧光标记方法观察PKC和锚蛋白的细胞内分布情况;利用红细胞变形仪测定红细胞的变形能力;测量红细胞衍射斑的长短轴之比表示红细胞变形指数。结果PKC激活剂佛波酯(PMA)处理实验组红细胞1min、5min、10min、30min、1h、2h,PMA处理后即刻发生锚蛋白的磷酸化、PKC和锚蛋白细胞Ribociclib体外内同步移位及共分布现象,磷酸化高峰值和发生这种分布改变的红细胞百分率于30min达最高。PMA处理的红细胞在不同切应力(50,100,200,300N/m2)下,其变形指数都于30min达最大;不同切应力下的变形指数都与发生PKC和锚蛋白细胞内同步移位的细胞百分率显著负相关。结论红细胞PKC活化后可以对锚蛋白进行磷酸化,并引起锚蛋白和CH5424802说明书PKC发生细胞内同步移位和共分布,这可能是造成红细胞变形性发生改变的新机制。”
“目的:分析复方丹参制剂的临床研究现状,并比较复方丹参片与滴丸对冠心病的治疗效果。方法:检索1994年1月~2007年12月国内外公开发表的有关复方丹参制剂的临床研究报道,对观察组病例数、适应症、治疗方式,以及复方丹参片和滴丸治疗冠心病的疗程、疗效等方面进行分析,并在此基础上就临床研究存在的问题进行探讨。结果:共纳入文献775篇。

结果金葡菌以时间依赖的方式诱导U937细胞凋亡。随着金葡菌感染时间的延长,Caspase-3和Cas-pase-9的表达逐渐增加,

结果金葡菌以时间依赖的方式诱导U937细胞凋亡。随着金葡菌感染时间的延长,Caspase-3和Cas-pase-9的表达逐渐增加,Caspase-3/-9蛋白酶活性随着培养时间的延长也逐渐上升。Caspases蛋白酶的抑制剂Z-DEVD-FMK和Z-LEHD-FMK能够抑制金葡菌诱导的U937细胞凋亡。结论Caspase-3/-9参与了金RAD001临床实验葡菌诱导的U937凋亡过程并发挥了重要的作用。”
“文章介绍了一种半合成法制备辅酶Q的路线,即由芳香性主环Q与有广阔开发前景的天然提取物茄尼醇进行加90合,制取心血管新药辅酶Q9。此法成本低,可以大量合成,为进一步进行药理研究提供基础。并概述了辅酶Q9(包括辅酶Qn一类化合物)的功效及其应用情况,对其进一步的开selleck发应用进行了展望。”
“目的探讨新合成的血管紧张素(1~7)[Ang(1~7)]类似物AVE0991对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导心肌肥大的抑制作用。方法在AngⅡ(10-6mol/L)诱导培养的SD乳鼠心肌细胞中,应用AVE0991及Ang(1~7)受体拮抗剂A-779等干预细胞,通过测定心肌细胞蛋白质合成速EPZ-6438 花费率,蛋白质含量和细胞表面积等指标,观察心肌细胞肥大情况;并利用RT-PCR及Western blot测定AVE0991对重要增殖信号通路转化生长因子(TGF)β1/Smad2的影响。结果AVE0991呈剂量依赖性抑制AngⅡ诱导培养的心肌细胞的蛋白质合成速率,并能减少AngⅡ诱导培养的心肌细胞的蛋白质含量和表面积;AVE0991通过明显下调AngⅡ诱导TGFβ1/Smad2信号通路的表达。

结论化合物2、3和4均为首次从楝属植物中分离得到的已知化合物。”
“为了研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)诱导癌细胞

结论化合物2、3和4均为首次从楝属植物中分离得到的已知化合物。”
“为了研究重组荞麦胰蛋白酶抑制剂(rBTI)诱导癌细胞凋亡的作用及其机制,采用细胞培养技术,以肝癌细胞系H22为靶细胞,以不同浓度的rBTI体外处理细胞不同时间后,采用MTT检测、DNA电泳分析、细胞核形态学观察、细胞色素c检测、caspases活性检测Anti-cancer Compound Library体内等方法测定rBTI在体外诱导肝癌细胞H22凋亡的作用。结果显示rBTI能够在体外特异性地抑制H22细胞的生长,诱导H22细胞凋亡,随着rBTI浓度及作用时间的增加,呈现剂量和时间依赖性效应。经rBTI处理的细胞可导致细胞色素c从线粒体释放到细胞质中,并能增强caspase-3、caspase-8BKM120 MW、caspase-9的活性。结果表明,rBTI能特异性地诱导H22细胞凋亡,其机制与caspase-3依赖性凋亡调节信号通路有关。”
“目的为有效控制生漆药材质量提供依据。方法应用液相色谱-离子阱质谱联用技术,分析生漆中漆酚类化合物。结果液相色谱共分离出11个组分,经离子阱质谱分析确定9个漆酚半抑制浓度类化合物。结论该方法可以快速、准确分析鉴别生漆中漆酚类化合物。”
“目的研究p70 S6K信号通路激活在黏液表皮样癌发生中的作用。方法检测p70 S6K在30例口腔黏液表皮样癌、15例正常口腔组织中的表达。结果免疫组织化学结果显示,和正常组织相比,黏液表皮样癌中p70 S6K的表达增加。结论口腔黏液表皮样癌p70 S6K的表达增加可能是介导黏液表皮样癌发生的主要机制之一。

采用HPLC-UV检测法测定游离大鼠肝细胞温孵体系中Ost的含量;从温孵时间、肝细胞含量、底物浓度3个方面考察Ost的代谢特征;探

采用HPLC-UV检测法测定游离大鼠肝细胞温孵体系中Ost的含量;从温孵时间、肝细胞含量、底物浓度3个方面考察Ost的代谢特征;探讨CYP2C8抑制剂槲皮素(Que)、CYP2C9抑制剂磺胺嘧啶(Sul)、CYP2D6抑制剂育亨宾(Yoh)、CYP3A4抑制剂醋竹桃霉素(Tro)、CYP450诱导剂利福平(Rif)对Ost体外代谢的影响。结果表明,Ost在游离大鼠不要肝细胞中呈现酶促动力学代谢特征;Rif可显著增加Ost在肝细胞中的代谢;Yoh、Sul和Que对Ost的代谢无明显影响;Tro在0~200μmol·L-1内呈剂量依赖性地抑制Ost的代谢。CYP3A4介导了Ost的体外代谢,CYP2C8、CYP2C9和CYP2D6未参与Ost在大鼠肝细胞中的代谢。”
“以赤潮异弯藻和海洋原甲藻为研究对象C646核磁,研究了海洋滩涂植物大米草对两种赤潮微藻的抑制作用及抑藻物质.结果表明:大米草对赤潮异弯藻的影响表现为高浓度抑制生长,低浓度则有一定的促进作用,大米草新鲜组织、干粉末和提取物浓度分别为4.8、0.8和0.5mg·ml-1以上时对赤潮异弯藻有致死作用;大米草对海洋原甲藻则表现出明显的抑制作用,且大米草新鲜组织、干粉末和提取物浓度分别为9.6购买BMS-387032、1.6和1.25mg·ml-1以上时对海洋原甲藻有致死作用.对大米草提取物进行抑藻活性物质的分离纯化,从中分离鉴定了2个具有抑藻活性的黄酮糖苷类化合物:异鼠李素-3-O-槐二糖-7-O-鼠李糖苷和丁香亭-3-O-半乳糖苷.”
“目的研究薜荔Ficus pumila中的化学成分,并对分离出的成分进行结构鉴定。方法采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱分离化合物,运用理化性质和波谱技术确定所得化合物的结构。

2例因齿龈增生明显选用第1种方案转换后,复查3个月症状明显好转,血肌酐稳定。1例因既往有脾功能亢进,术后口服环孢素或他克莫司达目标

2例因齿龈增生明显选用第1种方案转换后,复查3个月症状明显好转,血肌酐稳定。1例因既往有脾功能亢进,术后口服环孢素或他克莫司达目标浓度后,均出现严重的骨髓抑制选用第1种方案转换后,复查3个月症状明显好转,血肌酐稳定。3例有不同程度血脂升高,9例未见明显血脂升高现象。结论:对于快速代谢型肾移植患者,转换为雷帕霉素为较好的选择,主要通过早、中、晚3次口服抗排斥药物保持有效的抗此网站排斥药物浓度,同时增加神经钙蛋白抑制剂类抗排斥药物的浓度,有利于排斥的纠正和预防。急性排斥不是转换雷帕霉素的绝对禁忌证,但转换雷帕霉素后,神经钙蛋白抑制剂浓度应保持在相对较高的浓度,保持有效的抗排斥作用。”
“目前已经被确认的环境内分泌干扰物达100余种,其中能够诱导鱼类产生卵黄原蛋白(Vitellogenin,VTG)的环境内分泌干扰物包括农一般药、多氯联苯类化合物、邻苯二甲酸酯类化合物等几大类。由于环境内分泌干扰物结构的复杂性,其诱导机制成为近年研究的热点。本文综述了能够诱导鱼类产生VTG的环境内分泌干扰物的种类、筛选方法及作用机制。”
“目的综述降血脂天然产物的研究进展,为在天然药物中寻找研究降血脂的药物提供参考。方法通过查阅国内外相关文献共11篇,对不同化学类别的天然产物的不同所selleck化学属科进行分类。对兰科、山茶科、菊科、龙胆科、五加科、马尾藻科、茄科和桑科的降血脂药物,具体针对新化合物及结构新颖的天然产物进行综述。结果现已研究的、来源于天然产物的降血脂药物分布于多种植物中,具有不同的化学类别与结构特征。常见的有苷类、黄酮类和其他一些化合物等。结论综述结果可为天然降血脂药物的研究提供参考。”
“本论文首次采用傅立叶变换红外光谱法对云南当地药材石吊兰的根、茎、叶和花进行了对比研究,比较了它们红外光谱的异同。

01)。在Ins+血脂康组、AngII+血脂康组、Ins+AngII+血脂康组相比于对应未加入血脂康的Ins组、AngII组、In

01)。在Ins+血脂康组、AngII+血脂康组、Ins+AngII+血脂康组相比于对应未加入血脂康的Ins组、AngII组、Ins+AngII组COX-2mRNA和蛋白表则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。

(3) PGI2表达结果:血脂康组PGI2表达量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Ins组、AngII组、Ins+AngII组相比于对照组PGI2表达量明显减少(P<0.05);且Ins+AngII组相比于Ins组、AngII组减少更为明显(P<0.01);而在Ins+血脂康组、AngII+血脂康组、Ins+AngII+血脂康组相比于Ins组、AngII组、Ins+AngII组PGI2表达量升高(P<0.05)。 结论: 通过体外实验表明,AngII、Ins能促进细胞增殖,同时也能促进HUVECsCOX-2的mRN和蛋白表达,使得PGI2合成减少,且两者具有协同作用;而血脂康能一定程度上抑制细胞增殖,同时也可使AngII、Ins诱导的HUVECs的COX-2的mRNA和蛋白表达上调,PGI2合成水平增加。为研究AngII、高胰岛素血症促AS及他汀类抗AS作用进一步提供了理论依据。
研究背景和目的:吸烟是引发慢性阻塞性肺部疾病(Chronic Baf-A1 solubility dmso obstructive pulmonary diseases, COPD)的主要危险因素。香烟含有大量的氧化物质,这些氧化物能激活蛋白酪氨酸磷酸酶Shp2(protein tyrosine

phosphatase, Shp2)。Shp2是一种由PTPNII基因编码的蛋白酪氨酸磷酸酶,含有2个SH结构域,其作为细胞因子、生长因子及其他胞外刺激因素的下游信号分子广泛地表达于机体各种组织和细胞中,参与细胞增殖、分化、死亡等诸多细胞生命活动环节。我们之前研究证明吸烟和香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)能够激活人上皮细胞Shp2mRNA和蛋白的表达,Shp2抑制剂干预和肺上皮细胞Shp2基因敲除小鼠或细胞可减轻吸烟诱导的肺部炎症反应与上皮细胞炎症因子表达。本课题中我们探讨抑制和基因敲除Shp2减轻吸烟诱导小鼠肺纤维化的作用及机制。 方法: 1、整体实验:观察Shp2特异性抑制剂PHPS1干预和肺上皮细胞Shp2基因敲除小鼠对吸烟引起的肺纤维化指标的影响。小鼠每天吸烟10支,连续10天,诱导肺纤维化模型,检测指标包括转录生长因子β1(Transforming growth factor-β1, TGF-β1)、基质金属蛋白酶-9(Matrix metalloproleinase-9, MMP-9)、钙结合蛋白(Calcium binding protein, S100A4),胶原纤维沉积以及Shp2表达。 1)收集肺泡灌洗液(BALF),采用酶联免疫吸附(Elisa)法检测BALF上清中MMP-9和TGF-β1蛋白表达;

2)收集肺组织,制备匀浆上清液,采用定量多聚合酶链反应(Q-PCR)法测定匀浆上清液中MMPs和TGF-β1基因的表达; 3)制作肺组织切片,采用免疫组化染色法检测小气道周围Shp2、MMP-9和S100A4表达; 一般 4)肺组织切片,采用Masson胶原纤维染色法检测小气道周围胶原纤维沉积。 2、离体实验:观察Shp2特异性抑制剂PHPS1处理肺上皮细胞和Shp2基因沉默肺上皮细胞对CSE诱导的MMP-9和TGF-β1表达的影响,以及对信号分子的影响。 香烟烟雾提取物(CSE)刺激小鼠正常肺上皮细胞MLE-12: 1)采用MTT法测定MLE-12细胞活性; 2) Western blot (WB)法检测CSE诱导p-Shp2和Shp2表达; 3)CSE刺激MLE-12细胞,Q-PCR法检测MMPs基因表达,WB法检测MMP-9蛋白表达; 4)Shp2特异性抑制剂PHPS1干预细胞后进行CSE刺激,采用Q-PCR和WB法检测Shp2对CSE诱导MMP-9基因和蛋白的影响; 5)Shp2siRNA沉默Shp2基因后进行CSE刺激,采用WB法检测Shp2对CSE诱导MMP-9的调节作用。 香烟烟雾提取物(CSE)刺激人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549: 6)CSE刺激A549细胞,半定量多聚合酶链反应(RT-PCR)和Elisa法检测TGF-β1基因和蛋白表达; 7)Shp2特异性抑制剂PHPS1干预A549细胞后进行CSE刺激,采用Q-PCR法检测Shp2对CSE诱导TGF-β1基因表达的影响; 8)作用机制研究:预先给予Erk1/2抑制剂U0126, JNK抑制剂SP600125,p38抑制剂SB203580阻断Erk1/2, JNK和p38的活性,CSE刺激MLE-12细胞后,Q-PCR和WB法检测CSE诱导MMP-9表达,研究分析其可能的作用机制。 结果: 1、整体实验: 1)小鼠经香烟烟雾暴露10天后,肺泡与小气道上皮细胞的Shp2表达显著增高; 2) BALF上清中MMP-9及TGF-β1的蛋白表达显著性增强;肺组织中MMP-9和TGF-β1基因水平表达明显升高;肺组织MMP-9、S100A4的表达量以及胶原纤维沉积明显升高; 3)与对照组小鼠相比,烟雾暴露小鼠经Shp2特异性抑制剂PHPS1干预后,BALF上清中MMP-9、TGF-β1的蛋白表达显著性下降;肺组织匀浆MMP-9和TGF-β1的基因表达水平亦明显降低,肺MMP-9、S100A4表达量以及胶原纤维沉积明显减少; 4)肺上皮细胞Shp2基因敲除小鼠与对照组小鼠相比,BALF上清中MMP-9和TGF-β1蛋白释放显著性下降,肺组织匀浆中MMP-9和TGF-β1的基因水平表达明显降低,肺MMP-9、 S100A4的表达量以及胶原纤维沉积同样明显减少。 2、离体实验: 1)细胞活力检测中,不同浓度的CSE(0.